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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 镰刀霉或黑曲霉的分泌蛋白相关问题
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nayitian_nan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-06 00:51:00:
羧甲基纤维素钠做固体支撑物？我孤陋寡闻没听说过，有人做过这个实验了吗？从什么地方得出这个想法的？

见笑了，主要是考虑要提取霉菌的分泌蛋白，固体培养基不能含有蛋白，所以有朋友这么建议，他当初想做类似实验，那时候想出的这么一个办法，不过没有实施，我也是第一次听说。
    不知道可行不，觉得将麸皮等蒸煮后，应该能把里面残存的糊粉层去掉。
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其实，猪也有理想
11楼2011-05-06 11:57:21
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nayitian_nan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-06 00:51:00:
羧甲基纤维素钠做固体支撑物？我孤陋寡闻没听说过，有人做过这个实验了吗？从什么地方得出这个想法的？

刚才回帖时候大意了，你已经做对培养基过灭菌后的检测了，我想我也这么试试
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其实，猪也有理想
12楼2011-05-06 12:05:08
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zhmdwf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by nayitian_nan at 2011-05-05 23:15:11:
提取分泌蛋白，培养基是个问题，不能引入外源蛋白质，你能把你的方法说的再详细一点吗？谢谢了

可以非蛋白氮源液体培养，可以提前或对数生长期加入诱导物，可以timecource酶活力高时，收集上清液，低温丙酮或盐溶液蛋白，得粗蛋白，如果纯化要过层析柱。多看看文献，要不同的菌株摸索条件的。一般拟合一个可行路线就可以了，又不是很难得到的酶。
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13楼2011-05-06 21:24:45
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nayitian_nan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhmdwf at 2011-05-06 21:24:45:
可以非蛋白氮源液体培养，可以提前或对数生长期加入诱导物，可以timecource酶活力高时，收集上清液，低温丙酮或盐溶液蛋白，得粗蛋白，如果纯化要过层析柱。多看看文献，要不同的菌株摸索条件的。一般拟合一个 ...

恩，自己摸索条件，这个我明白，谢了
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其实，猪也有理想
14楼2011-05-06 22:21:59
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