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nayitian_nan

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-06 00:51:00:
羧甲基纤维素钠做固体支撑物?我孤陋寡闻没听说过,有人做过这个实验了吗?从什么地方得出这个想法的?

见笑了,主要是考虑要提取霉菌的分泌蛋白,固体培养基不能含有蛋白,所以有朋友这么建议,他当初想做类似实验,那时候想出的这么一个办法,不过没有实施,我也是第一次听说。
    不知道可行不,觉得将麸皮等蒸煮后,应该能把里面残存的糊粉层去掉。
其实,猪也有理想
11楼2011-05-06 11:57:21
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nayitian_nan

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-06 00:51:00:
羧甲基纤维素钠做固体支撑物?我孤陋寡闻没听说过,有人做过这个实验了吗?从什么地方得出这个想法的?

刚才回帖时候大意了,你已经做对培养基过灭菌后的检测了,我想我也这么试试
其实,猪也有理想
12楼2011-05-06 12:05:08
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zhmdwf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by nayitian_nan at 2011-05-05 23:15:11:
提取分泌蛋白,培养基是个问题,不能引入外源蛋白质,你能把你的方法说的再详细一点吗?谢谢了

可以非蛋白氮源液体培养,可以提前或对数生长期加入诱导物,可以timecource酶活力高时,收集上清液,低温丙酮或盐溶液蛋白,得粗蛋白,如果纯化要过层析柱。多看看文献,要不同的菌株摸索条件的。一般拟合一个可行路线就可以了,又不是很难得到的酶。
13楼2011-05-06 21:24:45
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nayitian_nan

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhmdwf at 2011-05-06 21:24:45:
可以非蛋白氮源液体培养,可以提前或对数生长期加入诱导物,可以timecource酶活力高时,收集上清液,低温丙酮或盐溶液蛋白,得粗蛋白,如果纯化要过层析柱。多看看文献,要不同的菌株摸索条件的。一般拟合一个 ...

恩,自己摸索条件,这个我明白,谢了
其实,猪也有理想
14楼2011-05-06 22:21:59
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