应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这样的RNA电泳图，能不能做RT-PCR
101/1返回列表
查看: 2217  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wkl1984

金虫 (小有名气)

[求助] 这样的RNA电泳图，能不能做RT-PCR

用普通的电泳液和1%的琼脂糖跑点泳，结果如下，还能不能做RT-PCR？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-01 09:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forward19

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

wkl1984(金币+2): 2011-05-01 10:38:40
应该有DNA污染吧？去除DNA污染，再用2%的胶跑一次。条带没有弥散的话就可以了
赞一下 回复此楼
2楼2011-05-01 10:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wkl1984(金币+2): 2011-05-01 10:41:23
西瓜(金币+3): 鼓励 2011-05-04 16:27:32
抽的RNA还行，降解的不多，但是基因组挺亮的，是不是没有去基因组呢？如果你做的是真核生物的定量，并且设计的引物是跨内含子的，可以不去基因组；但如果你做的是原核生物的，必须把基因组去干净才能做。你最好以RNA为模板，跑一个目的基因的PCR，看能不能跑出来，如果能的话就不行了，有DNA污染；如果用RNA跑不出目的基因，那你就可以大胆用了
赞一下(1人) 回复此楼
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
3楼2011-05-01 10:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkl1984

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-05-01 10:31:29:
抽的RNA还行，降解的不多，但是基因组挺亮的，是不是没有去基因组呢？如果你做的是真核生物的定量，并且设计的引物是跨内含子的，可以不去基因组；但如果你做的是原核生物的，必须把基因组去干净才能做。你最好以 ...

我随后做了RT-PCR，扩增图谱如下，就是条带不清晰，用的是随机六聚体引物，marker好像没有分开
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-01 10:41:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)
不好意思，我没做过随机六聚体的，帮不上了，抱歉
赞一下 回复此楼
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
5楼2011-05-01 10:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkl1984

金虫 (小有名气)
лл
回复此楼
6楼2011-05-01 11:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

confus

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该可以吧，我前面提的也有些弥散，反转录后PCR效果还可以，楼上说真核生物一定要设计跨内含子的引物吗？请问这样的引物你是怎么设计的？
赞一下 回复此楼
7楼2011-05-01 11:18:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wkl1984(金币+2): 2011-05-04 12:22:34
西瓜(金币+4): 鼓励交流。加这步的话RNA损失确实很多。 2011-05-04 16:28:37
DNA污染严重，可以用DNA酶消化，但是最好重新提取RNA，因为用DNA酶消化效果不好，消化完可能RNA也差不多了。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-05-03 10:39:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biofeixue

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

怎么看不到你的图？
赞一下 回复此楼
9楼2011-05-04 14:47:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkl1984

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-04 14:47:00:
怎么看不到你的图？

这样的图，麻烦你看一下了
赞一下 回复此楼
10楼2011-05-04 17:31:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wkl1984 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 6/300 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +8 a089 2026-08-07 8/400 2026-08-14 18:46 by beefly
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭