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xiaoweiwei121

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这潭水蓝的深邃

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【答案】应助回帖

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dhd997(金币+6, EPI+1): 应助一并奖励！ 2011-04-30 09:14:57

FLICR: 5`-ccgCTCGAG ttaacccagtaaagagaggacgt-3`
如果你给的序列是对的
这个就是错的了应该是CGC而不是CCC吧
你加了酶切识别序列吗？
貌似你这些都没说，只说这些，没人知道到底是合适不合适

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2楼2011-04-30 05:09:15

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xiaoweiwei121

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【答案】应助回帖

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西瓜(金币+5, EPI+1): 辛苦了！ 2011-05-04 00:47:56

这是不是你的载体序列？如果不是，请提供一下你的两个酶切之间的序列，及读码
我在网上搜的，如果不对的话，你提供一下
图谱

序列
NdeI Type II restriction enzyme 5' CA^TATG 3'
NcoI Type II restriction enzyme 5' C^CATGG 3'
NdeI 和NcoI 之间的序列，
C ATA TGG CTG CCG CGCGGCACCAGGCCGCTGCTGTGATGATGATGATGATGGCTGCTGCCCATGGTATATCTCCTTCTTAAAGTTAAACAAAATTATTTCTAGAGGGGAATTGTTATCCGCTCACAATTCCCCTATAGTGAGTCGTATTAATTTCGCGGGATCGAGATC
如果我现在给出的两个酶之间的序列是对的，那你的引物不仅退火温度相差大，
而且读码框也改变了，所以你自己多看书，好好琢磨一下吧
这是第一步，如果这里弄不好，下边做再多也没用

ps：偶是新手，如有不当之处，欢迎讨论

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8楼2011-05-03 23:27:15

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