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hubeilj1108

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 我们做荧光定量CT值有一个阈值线，这个阈值线可以手动调吗？

我们做荧光定量CT值有一个阈值线，这个阈值线可以手动调吗？相同的基因我们需要把阈值线调到一个一个标准吗？那么这样手动调以后那么多板都要调的话会不会很麻烦，我想问那个机器自动生成的阈值线会不会相同的基因都是一个值

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1楼 2011-04-26 15:25:35

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475502411

铜虫 (著名写手)

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引用回帖:

Originally posted by 西瓜 at 2011-04-26 20:02:06:
你说的不同板子是指不同次的PCR吧？这个是不可以的哦。PCR是一个灵敏的反应，起始条件的细微改变都会造成很大的变化，而且影响PCR的因素很多，所以只有同一次跑的PCR样品才能比较。相对定量的话，如果没有内参 ...

哦，内参是消除样品之间的误差，不能平衡各批次PCR之间的差异，是吧？

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7楼2011-04-26 20:57:49

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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
hubeilj1108(金币+1): 2011-04-26 19:09:02
dhd997(金币+5): good 2011-04-26 19:29:09

1.阈值线可以手动调的，只要是在指数扩增期就可以了，不会影响最后的结果。
2.阈值线不是针对某一个基因，是针对“同一次PCR”里面的所有样品、所有基因，并不是“相同的基因阈值线都一样”哦。不同次的PCR，阈值线一般不一样。
3.软件一般都可以根据某此PCR里所有样品的扩增曲线，自动设置阈值线。一般就用软件自动设置的就ok啦。

说得不是很详细，因为我觉得阈值的定义啥的你一定很清楚了。如果还不清楚就再问我吧