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yaoxuexuezi至尊木虫 (职业作家)
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[求助]
硫乙醇酸盐肉汤和硫乙醇酸盐培养基的区别
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| 我想取小鼠腹腔巨噬细胞，请问应该给小鼠注射什么？硫乙醇酸盐肉汤还是硫乙醇酸盐培养基？这两个有什么区别？急急急，希望大家给个正解 |
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shuiguoshala
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你好 我请教一下， 你的腹腔巨噬细胞培养成功了么 我的腹腔巨噬细胞用PBS取， 用RMI-1640培养基 和太牛血清培养的 总是不成功 ①取5-10只小鼠,颈椎脱臼处死，75%(体积分数)酒精浸泡3min,取出小鼠，置于培养皿内，腹面朝上；②用镊子提起小鼠下腹部皮肤，剪开一小口，撕开皮肤，完全暴露腹膜；③10mL注射器装上大号针头，吸入10mL预冷的无菌PBS缓冲溶液（pH 7.2-7.4）（0.02mol/L??），用镊子提起腹膜，向腹腔中注入培养液，针尖朝上，避开肠和脂肪，回抽腹腔液，不同方向冲洗数次，吸出腹腔液；④细胞悬液于4℃1000r/min离心5-10分钟，用RPMI-1640培养液液洗一次，用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液悬浮细胞；⑤将细胞悬液接种于细胞培养平板上，37℃培养2-3小时后，轻轻吸弃上清，再用预热培养基洗3次，洗去未贴壁细胞，得纯化的小鼠腹腔巨噬细胞；⑥收集纯化的小鼠腹腔巨噬细胞，台盼蓝染色计数细胞并测定细胞活力，巨噬细胞含量由超显微镜观察计数得到；⑦将纯化细胞调整到一定的浓度（2×106细胞/mL，1×106细胞/mL or 5×105细胞/mL），细胞悬液按1mL（100μL）/孔接种于无菌的24孔（96孔）塑料培养板中，37℃培养24小时后，备用，进行后面的实验研究。【⑤台盼蓝染色计数细胞并测定细胞活力；调整细胞浓度至2×106细胞/mL（1×106细胞/mL or 5×105细胞/mL），细胞悬液按1mL（100μL）/孔接种于无菌的24孔（96孔）塑料培养板中，37℃培养2-3小时后，轻轻吸弃上清，再用预热培养基洗3次，洗去未贴壁细胞，得纯化的小鼠腹腔巨噬细胞，备用。 想问问有什么问题 |
3楼2012-04-22 22:34:52
qfw_68
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【答案】应助回帖
yaoxuexuezi(金币+5, 博学EPI+1): 非常准确，非常有用！ 2011-04-26 15:59:53
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硫乙醇酸盐肉汤（Thioglycollate broth ）＝（液体）硫乙醇酸盐培养基（Fluid Thioglycollate Medium） 参考： Thioglycollate broth (Fluid Thioglycollate Medium) https://www.austincc.edu/microbu ... ycollate_medium.php 配方： https://www.hopebiol.com/standard/medium_1271.htm |
2楼2011-04-26 10:27:22
yaoxuexuezi
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shuiguoshala4楼2012-04-23 08:01:55
shuiguoshala
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5楼2012-04-23 12:23:00
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