24小时热门版块排行榜    

查看: 3228  |  回复: 5
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

megalt

金虫 (初入文坛)

[求助] DEAE分离多糖时Nacl梯度洗脱的浓度如何确定

DEAE分离多糖时Nacl梯度洗脱的浓度如何确定
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbzlj0518

银虫 (小有名气)

引用回帖:
815791楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-05-09 18:59:15
上样Buffer                 走完继续1柱体积
洗脱buffer + 100 mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 200 mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 500 mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 1000 mM  NaCl    5个柱 ...

受教了!
6楼2012-08-27 11:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

maobohe

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-05-09 13:26:39
megalt(金币+20): 2011-05-12 22:08:51
NaCl先从比较稀的浓度开始,比如0.05M、0.1M,慢慢提高NaCl的浓度,同时测定洗脱液中有无多糖析出,然后在有洗出峰处的NaCl浓度周围确定
2楼2011-05-09 11:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-05-09 21:56:38
rainwander(EPI+1): 2011-05-09 21:56:43
上样Buffer                 走完继续1柱体积
洗脱buffer + 100 mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 200 mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 500 mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 1000 mM  NaCl    5个柱体积

基本上全部走完,可以摸清出NaCl的大体范围。

继续深化,例如很可能在200~500 mM之间:
洗脱buffer + 200mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 300 mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 400mM  NaCl    5个柱体积
洗脱buffer + 500 mM  NaCl    5个柱体积

这样一天之内,你就可以完成任务了。
在小试阶段,最好凝胶用1-5mL小体积,否则过柱很花时间。
NaCl可配置母液,然后调到buffer所用pH。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2011-05-09 18:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-05-09 21:57:00
有没有AKTA纯化仪?那样就可以用连续线性梯度洗脱,根本不用摸索什么梯度。如果没有,就只能用不连续线性梯度了,只能自己摸索梯度。其实也不要紧,就是个预备试验,多摸索几个梯度就出来了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-05-09 21:15:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 3/150 2026-09-01 01:52 by o3EMxHUAQDtS
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 3/150 2026-09-01 01:40 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:23 by o3EMxHUAQDtS
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:12 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见