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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 副溶血性弧菌计数问题
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lovestrings

金虫 (小有名气)

[求助] 副溶血性弧菌计数问题

现在每天在做副溶血性弧菌的计数实验，先挑标准菌株单菌落到TSB+3%NaCl的培养基中，摇床培养4小时，然后用营养琼脂+3%NaCl的平板进行计数，刚开始用0.1ML菌液涂平板，发现怎么涂也涂不均匀，菌都叠在一起没有办法计数，后面换成了倾注法，也是用0.1ML的菌液，培养后菌倒是长出来了，但是就是因为倾注法使一部分细菌不是在培养基表面，而是在内部，导致内部有很多很小很小的菌落，计数的时候一样看不清楚。现在请高手指点一下，怎么样才能改进这两种情况，谢谢~~
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1楼 2011-04-23 20:01:03
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linyahui

禁虫 (小有名气)
★ ★
scelab(金币+2): 谢谢交流 2011-04-24 09:48:11
本帖内容被屏蔽
2楼2011-04-24 09:34:03
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fbcf7f7

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
wolfebst(金币+1): 谢谢回答 2011-04-24 22:26:12
引用回帖:
Originally posted by lovestrings at 2011-04-23 20:01:03:
现在每天在做副溶血性弧菌的计数实验，先挑标准菌株单菌落到TSB+3%NaCl的培养基中，摇床培养4小时，然后用营养琼脂+3%NaCl的平板进行计数，刚开始用0.1ML菌液涂平板，发现怎么涂也涂不均匀，菌都叠在一起没有办法 ...

最重要的是提高稀释倍数，要是有条件的话可以用机器涂布和计数
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3楼2011-04-24 14:42:33
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hzl5888

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wolfebst(金币+1): 谢谢回答 2011-04-24 22:26:37
lovestrings(金币+3): 2011-04-25 15:00:22
接种量可以控制一下，我一般是以1%的接种量接的，30度，培养18小时，菌悬液的浓度应该会在10 8次。100微升涂布跟倾注都是可以的，两种方法我都试过，但是涂布的效果会比较好。
楼主的实验室如有条件，可以用自动菌落分析仪来计数。
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4楼2011-04-24 20:07:21
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wangyan1061

新虫 (初入文坛)
LZ，请教个问题，我的副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水活化了-80度储藏的菌株后，大概10的8次方，在TCBS上划线，为什么啥也没有长出来啊~~~是菌的活力不够吗？3Q~~
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5楼2011-06-29 13:44:45
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lovestrings

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wangyan1061 at 2011-06-29 13:44:45:
LZ，请教个问题，我的副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水活化了-80度储藏的菌株后，大概10的8次方，在TCBS上划线，为什么啥也没有长出来啊~~~是菌的活力不够吗？3Q~~

如果-80度保存了后，拿出来先活化一下吧，不要直接去划TCBS，先试着用3%氯化钠的TSA来活化，或者用3%氯化钠的TSB摇床培养活化，活化后再划TCBS吧~~
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6楼2011-06-29 15:37:02
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1576127095

新虫 (初入文坛)
我也是做副溶血弧菌的，研一，请问你有没有副溶血弧菌的工作曲线啊
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7楼2014-11-26 09:32:38
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忽而今夏HG

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by linyahui at 2011-04-24 09:34:03
为什么不将菌液稀释一下呢？稀释10倍，或者100倍试试

请教一下，我最近也在做副溶血性弧菌的稀释涂布，用的是TSA加3%Nacl平板，原液用PBS稀释之后10的-1有菌生长，并且菌落较多，10的-2就不长菌，做了几次都是这样，帮忙分析一下，谢谢
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8楼2018-07-11 15:32:13
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