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lovestrings

金虫 (小有名气)

[求助] 副溶血性弧菌计数问题

现在每天在做副溶血性弧菌的计数实验,先挑标准菌株单菌落到TSB+3%NaCl的培养基中,摇床培养4小时,然后用营养琼脂+3%NaCl的平板进行计数,刚开始用0.1ML菌液涂平板,发现怎么涂也涂不均匀,菌都叠在一起没有办法计数,后面换成了倾注法,也是用0.1ML的菌液,培养后菌倒是长出来了,但是就是因为倾注法使一部分细菌不是在培养基表面,而是在内部,导致内部有很多很小很小的菌落,计数的时候一样看不清楚。现在请高手指点一下,怎么样才能改进这两种情况,谢谢~~
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linyahui

禁虫 (小有名气)

★ ★
scelab(金币+2): 谢谢交流 2011-04-24 09:48:11
本帖内容被屏蔽

2楼2011-04-24 09:34:03
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fbcf7f7

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


wolfebst(金币+1): 谢谢回答 2011-04-24 22:26:12
引用回帖:
Originally posted by lovestrings at 2011-04-23 20:01:03:
现在每天在做副溶血性弧菌的计数实验,先挑标准菌株单菌落到TSB+3%NaCl的培养基中,摇床培养4小时,然后用营养琼脂+3%NaCl的平板进行计数,刚开始用0.1ML菌液涂平板,发现怎么涂也涂不均匀,菌都叠在一起没有办法 ...

最重要的是提高稀释倍数,要是有条件的话可以用机器涂布和计数
3楼2011-04-24 14:42:33
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hzl5888

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wolfebst(金币+1): 谢谢回答 2011-04-24 22:26:37
lovestrings(金币+3): 2011-04-25 15:00:22
接种量可以控制一下,我一般是以1%的接种量接的,30度,培养18小时,菌悬液的浓度应该会在10 8次。100微升涂布跟倾注都是可以的,两种方法我都试过,但是涂布的效果会比较好。
楼主的实验室如有条件,可以用自动菌落分析仪来计数。
4楼2011-04-24 20:07:21
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wangyan1061

新虫 (初入文坛)

LZ,请教个问题,我的副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水活化了-80度储藏的菌株后,大概10的8次方,在TCBS上划线,为什么啥也没有长出来啊~~~是菌的活力不够吗?3Q~~
5楼2011-06-29 13:44:45
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lovestrings

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wangyan1061 at 2011-06-29 13:44:45:
LZ,请教个问题,我的副溶血性弧菌用3%氯化钠碱性蛋白胨水活化了-80度储藏的菌株后,大概10的8次方,在TCBS上划线,为什么啥也没有长出来啊~~~是菌的活力不够吗?3Q~~

如果-80度保存了后,拿出来先活化一下吧,不要直接去划TCBS,先试着用3%氯化钠的TSA来活化,或者用3%氯化钠的TSB摇床培养活化,活化后再划TCBS吧~~
6楼2011-06-29 15:37:02
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1576127095

新虫 (初入文坛)

我也是做副溶血弧菌的,研一,请问你有没有副溶血弧菌的工作曲线啊
7楼2014-11-26 09:32:38
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忽而今夏HG

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by linyahui at 2011-04-24 09:34:03
为什么不将菌液稀释一下呢?稀释10倍,或者100倍试试

请教一下,我最近也在做副溶血性弧菌的稀释涂布,用的是TSA加3%Nacl平板,原液用PBS稀释之后10的-1有菌生长,并且菌落较多,10的-2就不长菌,做了几次都是这样,帮忙分析一下,谢谢
8楼2018-07-11 15:32:13
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