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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 求问一个百思不得其解的问题！
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好！

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by elvias at 2011-04-22 22:32:02:
我觉得可能是与酶的催化条件有关，包内分泌裂解后整体水平应该为生理水平，相对的的酶活应该属于生理水平上的，但分泌到胞外后，培养基的离子浓度，PH值可能不能使酶活达到最高，因此出现上述的情况。

我认同你的观点。
这酶。很娇贵的啊、
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最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。
11楼2011-04-24 16:39:39
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roomofxw

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

酵母培养后，菌液好像是酸性，分泌出来，可能因为pH的问题导致酶活性下降
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12楼2011-04-24 19:30:03
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xiajungang

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2011-12-24 15:29:53
一般来说大肠杆菌比酵母的蛋白表达量要高的，你比较的是混合蛋白（破碎液和发酵上清）的比活力吧。我觉得你的大肠体系要比酵母中目的酶的含量更高些，可以进行SDS-PAGA。尽量保证上样总蛋白（mg）一样，看看目的酶含量的差异就知道了。希望能帮到你。
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吃苦耐劳，勇于创新，乐观热情，积极向上！
13楼2011-12-24 00:41:30
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励下 2011-12-24 15:30:05
你的酵母表达前目的基因有没有测过序？会不会是基因突变了？
还有就是酵母表达时有没有做梯度筛选高拷贝？
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勤奋、执着、专注，则无坚不破。
14楼2011-12-24 08:59:59
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pophust

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你在比较2者活性的时候，难道不是同ug，同反应条件的(pH,温度，buffer，etc)？
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15楼2011-12-24 12:10:49
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AnaSequence

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励新虫！欢迎常来啊！ 2011-12-24 15:30:22
表达有高有低很正常，而且酵母表达外源基因的优势在于分泌，方便下游处理，可以高密度培养从而获得高产。
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16楼2011-12-24 12:54:29
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