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雪湛蓝

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[求助] 磷酸盐缓冲液的浓度对蛋白的影响

pH7.0的磷酸盐缓冲液的不同浓度对蛋白的是否有影响？我是要用来做过柱的洗脱剂，过Sephadex G-75的柱。

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脚踏实地追求科学真理！

1楼 2011-04-22 10:58:09

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雪湛蓝

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引用回帖:

Originally posted by MaoNaiJi at 2011-04-24 12:32:02:
盐浓度过高可能破坏蛋白亚基之间的相互作用引起亚基解离；盐浓度过低，溶液的离子强度弱会影响洗脱效果，所以有时候洗脱液中会加100 mM左右的氯化钠，梯度洗脱也是这个原理。
一般PBS洗脱浓度可以考虑50-100 mM.

PBS的浓度是指磷酸盐的总浓度吗？还是单指磷酸二氢钠或磷酸氢二钠或是钾盐的浓度？

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脚踏实地追求科学真理！

7楼2011-04-24 15:28:16

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徐亚萍

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+1): 谢谢分享 2011-04-22 19:15:29
雪湛蓝(金币+1): 2011-04-23 12:09:49
看天(金币+5): 鼓励分享经验：我最近测酶活发现tris缓冲液对酶活性有极大的抑制作用可能也是浓度过高 2011-04-25 08:56:05
看天: 2011-04-25 08:56:39

盐的浓度过高会是蛋白失活，我用Tris-NaCl纯化时得出的经验；供参考，不一定对。