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cxhjm

银虫 (小有名气)

[求助] 为什么水提取的多糖,脱蛋白脱干净后,最终乙醇80%浓度沉淀不下来,为什么?

如题,求高人指点。粗多糖确实可以。但是蛋白脱的越干劲,越不好沉淀。
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
junwen6516(金币+2, 食品EPI+1): 鼓励交流 2011-04-21 22:16:12
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 10:20:50
可能有以下几个原因:
1.可能这是糖蛋白,你用的脱蛋白方法可能将糖蛋白复合物一起脱除了;
1.脱蛋白时多糖损失严重,溶液中剩余的多糖含量很少,所以沉淀很少;
2.多糖降解,分子量太小,无法沉淀。
2楼2011-04-21 21:24:22
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cxhjm

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wujia115 at 2011-04-21 21:24:22:
可能有以下几个原因:
1.可能这是糖蛋白,你用的脱蛋白方法可能将糖蛋白复合物一起脱除了;
1.脱蛋白时多糖损失严重,溶液中剩余的多糖含量很少,所以沉淀很少;
2.多糖降解,分子量太小,无法沉淀。

我连水提取的粗多糖,也不能沉淀。但是碱提取的无论是水提取的还是去完蛋白的都很好沉淀。
我想是碱性环境把亲水基团都中和了,还是怎么这么的。
很郁闷,能有什么办法解决这个问题吗,我只能想到冷冻干燥了。
3楼2011-04-22 15:09:15
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

cxhjm(金币+5): 谢谢 2011-04-22 15:22:38
cxhjm(金币+2): 2011-04-26 10:45:33
可能水不是目标多糖的合适溶剂,所以用中性的水提取得到的多糖量很小,溶液中浓度很低,因而难以用80%乙醇沉淀;而碱性的水溶液可以提取出较多的目标多糖,所以可以用80%乙醇沉淀。
你可以测定多糖的中性水提取液中的总糖含量,如果值很低,就可以确定是上述原因。
4楼2011-04-22 15:17:01
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cxhjm

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wujia115 at 2011-04-22 15:17:01:
可能水不是目标多糖的合适溶剂,所以用中性的水提取得到的多糖量很小,溶液中浓度很低,因而难以用80%乙醇沉淀;而碱性的水溶液可以提取出较多的目标多糖,所以可以用80%乙醇沉淀。
你可以测定多糖的中性水提取液 ...

我测定测过,水提取的确实得率很低,但是由于实验需要,所以必须要制备其样品进行比较
5楼2011-04-22 15:22:02
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

cxhjm(金币+2): 2011-04-26 10:45:41
cxhjm(金币+11): 2011-04-26 10:45:45
那就用中性热水提取,然后浓缩提取液,再用合适的方法干燥可以得到中性水提取的多糖样品。
6楼2011-04-22 16:47:53
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MLX1314

新虫 (初入文坛)


hsd3521: 金币+1, 鼓励新虫交流,欢迎常来 2012-07-12 20:35:56
我用的是石灰乳法脱蛋白  为什么脱去多少蛋白多糖就损失多少啊  ?如果说我的多糖大部分是以糖蛋白的形式存在的  那么我还用脱蛋白吗
7楼2012-07-10 10:10:58
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gsli1987

木虫 (正式写手)

可能加一点氯化钠会好沉一些
每个人都生来孤独
8楼2012-12-04 22:55:30
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jintoujiedi

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-12-11 07:24:43
首先可以用molish或者要是愿意的话测一下总糖含量,验证到底是真的没有糖还是别的原因。如果检测出来有的话,很有可能就是你的浓度太低的缘故,(你提到了提取率低)解决的方法无非就是浓缩。要不你用玻璃棒试着摩擦烧杯的内壁,看会不会有晶核,这样也能起到效果
9楼2012-12-07 13:47:11
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yangweijiang

新虫 (初入文坛)

多糖醇提以后再二氧化碳萃取可以吗,请内行回答,急等
10楼2015-08-20 13:31:53
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