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jiajunhui

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 蓝白斑筛选出现的问题

大家好,我在做蓝白斑筛选的时候使用宝生物的PMD18-T载体,我在做阴性对照的使用灭过菌的双蒸水代替PCR产物与载体连接,可是在平板上长出来的菌都是白斑,我不能理解为什么阴性对照长出来的不是蓝斑都是白斑?
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 不错 2011-04-22 09:18:17
jiajunhui(金币+1): 2011-04-22 09:36:26
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-21 22:54:24:
1:板子上长出来的全部是白斑不是蓝斑说明连接没什么问题啊,你的目的基因插入到了LacZ上面,当然了你可以进行酶切或者PCR验证滴。。。
2:至于你说你阴性对照的板子上全部是白斑,这个阴性对照的板子上面应该都 ...

楼主那种阴性对照的做法,可以检测载体自连的比例有多高,我们一般像楼主那样做呢。
个人觉得X-gal、IPTG有问题的可能性比较大,呵呵~
5楼2011-04-21 23:09:09
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