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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮忙分析一下PCR电泳图
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piggpi

金虫 (小有名气)

[求助] 大家帮忙分析一下PCR电泳图

提鳗鱼总ＲＮＡ后直接ＲＴ，接下来的PCR电泳结果如图。
我要的条带在３３０ｂｐ。可基本是非特异性条带。
我做的是小清蛋白克隆，以前克隆其他鱼的时候也是用同样的引物，以前没这种情况出现，有没有可能是引物降解了？
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在很久很久以前
1楼 2011-04-20 16:18:10
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快乐酒僧

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by piggpi at 2011-04-21 12:27:47
如图：
第一泳道是50bp的M，第4道是不加模板空对照，第5道所用引物为重新稀释的
第4道也有多条条带，那就是说引物肯定污染了。是这样吗？
还有学姐的意思是说后面四道上面的亮带是一样的，是染料对迁移率有影响。 ...

请问 空白对照 出现亮带 是不是说 必然污染了啊 我都是DNA没做rna 故问
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14楼2013-04-07 17:45:09
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): good 2011-04-20 17:16:36
piggpi(金币+2): 感谢参与！！！ 2011-04-21 10:22:01
你把引物做个空对照试试，就是不加模板，另外把退火温度提高点再扩增试试
赞一下(1人) 回复此楼
在等待中涅槃重生
2楼2011-04-20 16:20:52
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by piggpi at 2011-04-20 16:18:10:
提鳗鱼总ＲＮＡ后直接ＲＴ，接下来的PCR电泳结果如图。
我要的条带在３３０ｂｐ。可基本是非特异性条带。
我做的是小清蛋白克隆，以前克隆其他鱼的时候也是用同样的引物，以前没这种情况出现，有没有可能是引物 ...

看不到图片……不知道是不是我的问题……
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-20 17:17:16
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piggpi

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yuxia82012 at 2011-04-20 16:20:52:
你把引物做个空对照试试，就是不加模板，另外把退火温度提高点再扩增试试

我去试试。。。。
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在很久很久以前
4楼2011-04-20 18:40:35
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