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roomofxw

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1, EPI+1): 鼓励发帖应助。 2011-04-20 20:43:37
1.请验证模板是否OK
2.能否重复梯度PCR结果,包括PCR孔也要验证哦
3.是否是一管酶快用完了,剩下的活性不好了,或者不是同一批次的,可以做阳性对照
4.60-70度的梯度,确定是60度最佳,不科学啊,怎知降五度就不好呢?
5.应该保留梯度PCR产物,可以作为模板二次PCR;或者做阳性对照
重点检查模板,以及降低退火温度,不建议tag,保真性不好
说不定你梯度的那个孔在最边缘,设的六十度,实际只有58度……
9楼2011-04-20 19:43:53
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