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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

应助: 148 (高中生)
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性别: MM
专业: 微生物生理与生物化学

[交流] 急，急，急-关于菌种复壮问题已有19人参与

向各位高手们请教：
本人做得是细菌转化实验，年前上罐的单位都在20000以上，年后用同样的斜面活化后再上罐单位始终在15000左右徘徊，我们拿原来的菌株做过了复壮，诱变但结果还是不尽人意，甘油管，斜面，种子还有发酵都是重复的年前实验也是不行。往各位高手们多指教。

[ Last edited by amisking on 2011-4-18 at 19:19 ]

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希望大家多多交流。

1楼2011-04-18 14:09:09

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qwz

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 100 (初中生)
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虫号: 647323
注册: 2008-11-06
专业: 微生物生理与生物化学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

问题不知道解决了没？看了很长时间，体验楼主的焦急，往往这些问题问得太笼统，不好回答，做什么品种也不知道，也不知道是上实验小罐还是生产大罐。
做这样的产品，最可怕的是没有原始数据的积累，包括一些基础的生长曲线，要有生长曲线的累积和积累，问题也不难发现了，菌种的问题好像不是大问题，冻干管重复不出来发酵量，这个不是菌种问题，传代也没有超过想象的代数，这种对比只有同比的摇瓶表达对比，要是摇瓶表达和以前没有差异，问题出在大罐条件上，摇瓶出问题了，调整培养基恢复摇瓶水平。关于稳定的工程菌，在任何时候都要持续筛选，没有停留。要是摇瓶表达没有出问题的话，要从基础的生长曲线开始排查原因了，生长曲线恢复正常后，在从可以示踪的代谢或者营养物消耗跟踪大罐表达的问题，不同季节，不同设备，同一个品种出现这样的问题都是正常的，一个稳定的发酵产品和工艺，必须经过不同设备，不同季节的考验才算稳定的，楼主努力吧，做发酵更要细心和积累，都是累死人不偿命的工作丫，祝福大家

[ Last edited by qwz on 2012-8-16 at 13:29 ]