应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Genome Walking 上图啦，大伙帮忙看看怎么提高PCR质量
51/1返回列表
查看: 1730  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)

[求助] Genome Walking 上图啦，大伙帮忙看看怎么提高PCR质量

下面的是我买了宝生物的Genome Walking Kit做的PCR图，A2组好像效果还是有的，但是怎么才能提高特异性呢，当然是得到明显的特异性条带才能接着克隆测序啊，了解的大侠给点支持啊。谢谢了先
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-18 09:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周兵lofter

新虫 (小有名气)
个人感觉 你从第二次pcr到第三步pcr  稀释的倍数不够 。。  你稀释了多少倍？稀释倍数多了  你看看3A2能不能有单一条带出现。
赞一下 回复此楼
乐观向上 积极拼搏 热爱生命 用心生活
5楼2014-04-17 12:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

wolfebst

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): good 2011-04-19 13:49:47
你这种跑电泳的方式不对，应该A1的放在一起
个人感觉你的这几个都不对，应该是片段大小逐渐缩小
如果做得好的话，直接PCR产物测序就可以
我当时就是直接PCR产物测序
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-18 09:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feiye2214

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wolfebst at 2011-04-18 09:25:44:
你这种跑电泳的方式不对，应该A1的放在一起
个人感觉你的这几个都不对，应该是片段大小逐渐缩小
如果做得好的话，直接PCR产物测序就可以
我当时就是直接PCR产物测序

敢问大侠，如何才能做的好呢？给点意见呗
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-18 09:44:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+3): 经验很重要 2011-04-18 23:42:16
feiye2214(金币+5): 多谢指点 2011-04-19 13:15:35
西瓜(金币+3, EPI+1): 楼主说解决了问题，帮你申请的EPI，呵呵~ 2011-04-19 14:29:52
“当然是得到明显的特异性条带才能接着克隆测序啊”为什么这么想呢，你的目的是得到基因序列，纠结与此没必要啊，我只用三个库（精选），作到2A4这种程度就切胶克隆测序了，3周顺利拿到3K的序列，用最快的时间把这关过了，拿到序列干正经事吧。
赞一下(2人) 回复此楼
生命不息，探索不止。
4楼2011-04-18 21:56:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 15/750 2026-08-31 00:10 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:29 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 3/150 2026-08-30 20:10 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:23 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:53 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:50 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:20 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 18:18 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 17:34 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 面上意见出来了 +9 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 18/900 2026-08-30 16:47 by 黄鸟于飞Chao
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:14 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭