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reasonspare
木虫 (著名写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+5): 欢迎回归^_^ 2011-04-13 19:41:39
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lstt09nk(金币+5): 欢迎回归^_^ 2011-04-13 19:41:39
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Silver staining protocol Compatible with mass spectrometry, excellent signal-to-noise ratio (Ref: Protana website http://www.protana.com/services/protocols/default.asp) Buffers Fixer: 50% MeOH, 12% HAc, 0.05% formalin (35% Formaldehyde) 200 ml 100 ml MeOH (99.8%) 24 ml HAc (100%) 100 μl formalin (35% Formaldehyd) 76 ml H2O (Milli-Q) Wash: 35% EtOH (96%) 200 ml 73 ml EtOH 127 ml H2O Sensitizing: 0.02% Na2S2O3 200 ml 0.04 g Na2S2O3 200 ml H2O Silver nitrate:0.2% AgNO3, 0.076% formalin (35% Formaldehyde) 200 ml 0.4 g AgNO3 152 μl formalin (35% Formaldehyde) 200 ml H2O Developer: 6% Na2CO3, 0.05% formalin (35% Formaldehyde), 0.0004% Na2S2O3 400 ml 24 g Na2CO3 200 μl formalin (35% Formaldehyde) 8 ml 0.02% Na2S2O3 392 ml H2O Stop solution:50% MeOH, 12% HAc 200 ml 100 ml MeOH 24 ml HAc 76 ml H2O Procedure 1. Fix gel: 50% MeOH, 12% Hac, 0.05% formalin, 2 hrs or overnight 2. Wash gel: 35% EtOH for 20 mins. 3. Wash gel: 35% EtOH for 20 mins. 4. Wash gel: 35% EtOH for 20 mins. 5. Sensitize gel: 0.02% Na2S2O3 for 2 mins. 6. Wash gel: H2O for 5 mins. 7. Wash gel: H2O for 5 mins. 8. Wash gel: H2O for 5 mins. 9. Stain gel: 0.2% AgNO3, 0.076% formalin for 20 mins. 10. Wash gel: H2O for 1 min. 11. Wash gel: H2O for 1 min. 12. Develop gel: 6% Na2CO3, 0.05% formalin, 0.0004% Na2S2O3 13. Stop staining: 50% MeOH, 12% HAc for 5 mins. 14. Leave the gel at 4ºC in: 1% Hac Remark: For coomassie blue stained gel, wash O/N in water, then start from step 5. |
6楼2011-04-13 10:59:21
jhu132llh
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4楼2011-04-12 15:46:21