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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】银染法的具体步骤
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p2011

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】银染法的具体步骤 已有10人参与

求核酸PCR银染法的具体步骤..越详细越好，谢谢！！
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xhjggl

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1楼 2011-04-12 10:00:30
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wxlvip

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我现在在用的一种银染方法还挺好的，跟你分享下！步骤：卸板后用双蒸水漂洗一下，这个时间不要求，只是为了冲洗缓冲液；再固定 10%乙醇+5%乙酸 15min；银染：0.04%硝酸银 10min；漂洗 双蒸水 20s；显影 1.5%氢氧化钠+4%甲醛 2-5min（至出带为止）。具体可以看看潘尚领的那篇文章，我试过很多种方法，他的方法还是比较适合我。
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11楼2014-06-04 10:02:53
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-04-12 21:43:51
银染法还是比较麻烦的
你要是有《分子克隆实验指南》的话可以看那书的
那书上的方法
就很好用
我们常用的，一点问题也没有
很敏感，分辨率也很高
你是没书的话
估计得我有空才能给您讲讲了
赞一下(2人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
2楼2011-04-12 11:59:36
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p2011

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-04-12 11:59:36:
银染法还是比较麻烦的
你要是有《分子克隆实验指南》的话可以看那书的
那书上的方法
就很好用
我们常用的，一点问题也没有
很敏感，分辨率也很高
你是没书的话
估计得我有空才能给您讲讲了

真本书我有，但是我还想问一下你们染色是完全按照这本书上来的还是有一些条件优化？你们染色一次大概要多久？我原来用EB染色，但是胶的整体清晰度很差想要换银染试试，但是具体的实验条件不知道用不用摸索..
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-12 15:00:22
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-04-13 19:41:01
引用回帖:
Originally posted by p2011 at 2011-04-12 15:00:22:
真本书我有，但是我还想问一下你们染色是完全按照这本书上来的还是有一些条件优化？你们染色一次大概要多久？我原来用EB染色，但是胶的整体清晰度很差想要换银染试试，但是具体的实验条件不知道用不用摸索..

基本没有优化
就是按照它的步骤往下做
配液什么的配准了
显色的时候盯住了
仪但效果出来了就马上终止
跑的SNP都还很好的
没问题
一般染一次得一个下午的时间吧
赞一下(2人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
4楼2011-04-12 15:46:21
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