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zhyzx

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】蛋白表达,大肠杆菌总是死。。。

如题,我们是按照一般的蛋白表达的方法,将含有目的基因的重组质粒转化到表达菌株BL21中,用IPTG诱导表达。最近总是出现细菌摇着摇着总是死的情况,不管是IPTG诱导前后都有发生,不知道大家有没有遇到过这种情况啊?欢迎多多交流!
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zhyzx

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by xujian568 at 2011-04-09 16:01:38:
先看看你的表达蛋白是不是致死的哦?

应该不是,因为我们有好多蛋白在表达,而且之前我也提纯过一些这个蛋白
9楼2011-04-09 16:51:36
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会不会是噬菌体污染?
2楼2011-04-09 13:59:54
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zhyzx

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-09 13:59:54:
会不会是噬菌体污染?

应该不是,因为每次并不是说每瓶都死,有的还是好好的能用的。而且整个实验室好几个人在做蛋白,每个人都出现过这种情况。
3楼2011-04-09 14:12:41
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★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-09 18:13:48
表达的蛋白对细菌细胞本身有毒性作用
需要更温和的条件诱导以及更长的诱导时间

很难做
祝你好运
4楼2011-04-09 15:49:13
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