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【求助/交流】蛋白表达,大肠杆菌总是死。。。
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zhyzx
金虫
(小有名气)
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(幼儿园)
金币: 1118.4
帖子: 295
在线: 34.4小时
虫号: 697243
[交流]
【求助/交流】蛋白表达,大肠杆菌总是死。。。
如题,我们是按照一般的蛋白表达的方法,将含有目的基因的重组质粒转化到表达菌株BL21中,用IPTG诱导表达。最近总是出现细菌摇着摇着总是死的情况,不管是IPTG诱导前后都有发生,不知道大家有没有遇到过这种情况啊?欢迎多多交流!
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2011-04-09 13:46:51
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xujian568
至尊木虫
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dhd997(金币+2): 有道理。 2011-04-10 09:32:25
先看看你的表达蛋白是不是致死的哦?
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7楼
2011-04-09 16:01:38
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西瓜
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会不会是噬菌体污染?
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2楼
2011-04-09 13:59:54
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zhyzx
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Originally posted by
西瓜
at 2011-04-09 13:59:54:
会不会是噬菌体污染?
应该不是,因为每次并不是说每瓶都死,有的还是好好的能用的。而且整个实验室好几个人在做蛋白,每个人都出现过这种情况。
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3楼
2011-04-09 14:12:41
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jhu132llh
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1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-09 18:13:48
表达的蛋白对细菌细胞本身有毒性作用
需要更温和的条件诱导以及更长的诱导时间
很难做
祝你好运
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4楼
2011-04-09 15:49:13
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