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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电泳时候，什么时候用稳压？什么时候用稳流？？？
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李尉涛

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】电泳时候，什么时候用稳压？什么时候用稳流？？？ 已有7人参与

如题所述，电泳时候，什么时候用稳压？什么时候用稳流？？？我只知道电泳槽两端存在电压差是条带跑开的动力，但是稳压，稳流的原因就不知道了。有分子达人没？帮小弟解答一下吧。
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1楼 2011-04-09 02:32:22
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csdyg

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-04-09 08:36:01
在电泳的过程中，电压和电流的大小与板的长度，缓冲液的pH，离子强度等很多因素都有关系，而且二者之间又有互相制约的关系。
一般的电泳仪，可调的都是最大电压和最大电流，也许你已经注意到了，跑电泳的时候电压和电流二者很难同时都达到你设定的值，而是其中一个值符合，另一个比你设定的值要小。
例如你设定的最大电压150V，最大电流40mA,这时由于各种因素的影响，可能实际情况是这样的，电压100V，电流40mA，这样的时候就是恒流了，因为电压受电流的制约，不能再升高了，而最大电流已经达到了，如果想要调高电压，那么就需要把最大电流调高，电压才能相应升高。也有可能是这样的情况，电压150V，电流30mA，这时候就是恒压了，同理。
我一般使用恒压，因为电泳过程中，缓冲液电阻增大，如果保持恒流，有可能使体系过热导致溶胶。
楼主在跑电泳的时候只要确定是恒压还是恒流就可以了，个人认为二者没有大的差异，只要电压和电流都达到了一定的值，都是可以跑出好效果的，祝顺利。
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2楼2011-04-09 06:39:57
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★ ★
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1949stone(金币+2, EPI+1): 不错 2011-04-09 09:47:42
1、一般跑核酸用恒压,而跑蛋白质用恒流。
2、需要控制发热量时用恒功率，如转膜的时候一般会选择恒流或者恒功率。
3、SDS-PAGE 一般是恒压居多；Western Blot一般是恒流居多；核酸的 AE 是两者差别不大。
4、Gel Shift也是两者差别不大//注意散热就行

至于很多人迷惑的为什么恒压的条件下电流会缓慢升高的问题请参考下文：
http://www.mnstate.edu/provost/FasterDNAGels.pdf
文章索然比较老了
但是论述的是原理性的东东
论述的还可以的
大家都可以看看

[ Last edited by jhu132llh on 2011-4-9 at 09:46 ]
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
3楼2011-04-09 09:44:51
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫生化熊

优秀版主
★
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引用回帖:
Originally posted by csdyg at 2011-04-09 06:39:57:
在电泳的过程中，电压和电流的大小与板的长度，缓冲液的pH，离子强度等很多因素都有关系，而且二者之间又有互相制约的关系。
一般的电泳仪，可调的都是最大电压和最大电流，也许你已经注意到了，跑电泳的时候电压 ...

我们的电泳仪不知道咋了，电压就是调不上去，跳到100多V，电流就到400多接近500了~~~
看说明书说是可能缓冲液的问题，换过之后还是~~~
这个还有可能是什么原因呢~~~望指点一二~~~
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曾经的你/以为只要带着那把青春的长剑和赤子的良心就可以说服自己不出卖理想的灵魂/在最寂寞和不得不流泪的晚上/即使连自己都在笑自己傻/依然拔出怀中的长剑~~~
4楼2011-04-09 10:35:48
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
引用回帖:
Originally posted by yj-lzx at 2011-04-09 10:35:48:
我们的电泳仪不知道咋了，电压就是调不上去，跳到100多V，电流就到400多接近500了~~~
看说明书说是可能缓冲液的问题，换过之后还是~~~
这个还有可能是什么原因呢~~~望指点一二~~~

看看铂金丝有没有问题
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
5楼2011-04-09 15:53:50
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
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楼上几位高人都说了，我就不说啥了，不过顶个帖子！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2011-04-09 17:40:21
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guye1

金虫 (小有名气)
学习来了
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水木年华
7楼2011-04-09 18:33:16
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mamadexiao

木虫 (正式写手)
学习啊,小妹刚进....
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8楼2011-04-09 20:56:44
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0640409

银虫 (小有名气)
★
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还有这么多道理，受教了，我们实验室都是恒压，浓缩胶80V，分离胶120V，转膜10V
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9楼2011-04-14 21:26:02
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