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【求助】在体肠灌流实验,测定药物浓度异常
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jonathonswq
木虫
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[交流]
【求助】在体肠灌流实验,测定药物浓度异常
各位大牛,最近做了一个药物的在体肠灌流实验,但测得药物浓度基本不呈线性,甚至有时还上下波动,请达人指教。
我的药物是三萜皂苷,具体条件如下:
灌流液:krebs-ringer, 从sigma买的,后来添加了氯化钙和碳酸氢钠。采用酚红做体积校正,酚红浓度为20ug/ml。
药物浓度:5ug/ml,10ug/ml。该药物在krebs-ringer 缓冲液中的溶解度应该大于30ug/ml的。
试验方法:麻醉后,小肠上端,回肠下端结扎后插管。生理盐水冲洗干净后通入krebs-ringer缓冲液,氧气-二氧化碳(95:5),流速 2ml/min,开始10分钟后记为0时刻,随后流速为1ml/min。每半小时取样1ml,并补入同体积含酚红的缓冲液。
测了四五次了,药物剩余量总是不呈下降的线性,求大牛指点。
另外,灌流期间,需要大鼠保持清醒状态吗?貌似清醒状态大鼠会很痛苦一直挣扎,我一直在麻醉状态下测定药物肠道吸收的。
谢谢了。
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2011-04-06 16:35:54
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jonathonswq
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引用回帖:
Originally posted by
guona0329
at 2011-06-10 09:12:01:
我想开展在体肠灌流是实验,但是我有蠕动泵和循环水浴,但是不知道管路怎么办?自制吗?制成什么样的呢?
我用的是蠕动泵配的硅胶管路,你可以在入口和出口各接一条就可以构成闭合回路了。
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12楼
2011-06-10 10:17:50
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jonathonswq
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牛人们给点意见吧,放上来几天了,连个光顾的也没有,俺心里好凉啊。
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2楼
2011-04-10 21:24:59
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):给个红包,谢谢回帖交流
qinhy(金币+1): O(∩_∩)O谢谢~~~ 2011-04-11 09:56:37
jonathonswq(金币+1): 谢谢回复,对我帮助很大。 2011-06-14 23:22:50
你可以换一种重量法,试一下,因为酚红本身其实也存在着吸收,它的误差挺大的。你可以采取重量法测一下,这个误差相对要小一点,得的数据可能会好一点。
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2011-04-11 09:13:49
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):给个红包,谢谢回帖交流
jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-04-12 09:50:48
jonathonswq(金币+1): 谢谢回复,受益匪浅。 2011-06-15 22:53:41
大鼠肯定要麻醉的
你的药物剩余量不成下降趋势会不会是因为你流速太快
肠子吸收少
你可以把流速调成200ul/min或者尝试下别的流速
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2011-04-11 09:59:34
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