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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】高保真的taq酶怎么才能产生polyA尾巴

买了takara的高保真Taq酶，但是PCR只能产生平末端产物，连不到T载体上，怎么才能让PCR产生polyA尾巴呢？

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1楼 2011-04-06 14:35:53

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diaoyuhua

金虫 (小有名气)

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★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

学习了，正考虑这个问题那

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10楼2011-04-07 12:13:09

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lywinan

捐助贵宾 (职业作家)

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★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

加一点普通Taq酶，再延伸一段时间

赞一下(1人)

2楼2011-04-06 14:52:56

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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-04-06 18:21:55

可以使用平端克隆试剂盒

也可以纯化PCR产物后加点Taq酶72度孵育10min，再纯化后连接

当然，中间跳掉两次纯化也是可以的，但是TA克隆效率会低一些，具体低多少没有试过

赞一下(2人)

3楼2011-04-06 14:54:04

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yabxxh

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
看天(金币+2): 鼓励分享 2011-04-06 18:22:10

我觉得还是全式金的peasyblunt好一点，还配有感受态，以前买的加A反应液都被我丢掉了，怎么感觉有点像广告？呵呵

赞一下(3人)

4楼2011-04-06 14:57:39

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