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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】半定量PCR啊，做不出结果啊。。。高手指教啊...
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轻轻轻轻轻

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】半定量PCR啊，做不出结果啊。。。高手指教啊... 已有4人参与

我想请问一下关于半定量PCR的问题。用半定量PCR比较细胞里面mRNA的量。


我们的半定量PCR条带是跑出来了，但是有的分子条带不是很好，竟然有些不知道什么的东西跑到了和maker最前面的几个分子对齐的位置。。。

这是怎么回事？

还有虽然条带出来了但是各个实验组之间应该有差距的完全没有差距。。。
我看我们跑出来的条带都特别亮，我自己猜想会不会是因为跑得CDNA量太多了，所以所有条带都非常非常亮，就比较不出来结果了呢？

还有什么需要注意的地方会影响条带的亮度？

[ Last edited by 轻轻轻轻轻 on 2011-4-6 at 20:56 ]
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1楼 2011-04-05 22:36:49
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小橘子~

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 鼓励新虫友回帖参与交流！ 2011-12-23 09:53:52
我也在半定量，大家多交流哈
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-12-22 21:20:40
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luona

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-04-06 08:13:06
也有可能是循环数太多了。你要调好内参基因在往下做。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-04-05 22:55:29
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轻轻轻轻轻

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by luona at 2011-04-05 22:55:29:
也有可能是循环数太多了。你要调好内参基因在往下做。

谢谢啊

你知道还有什么需要注意的地方会影响条带的亮度吗？

[ Last edited by 轻轻轻轻轻 on 2011-4-6 at 20:58 ]
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换个拉风的头像
3楼2011-04-06 10:51:38
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liling77ll

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也想知道啊？最近开始做半定量，感觉什么都不懂
赞一下(1人) 回复此楼
做最好的自己，和自己的昨天对比
5楼2011-08-21 20:59:35
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