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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】复杂样品中的DNA定量
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】复杂样品中的DNA定量

纯培养的微生物DNA定量用分光光度计会比较准，但像土壤中提取的DNA如果用分光光度计定量的话就会偏差很大，不知大家有何看法，或者像这种复杂环境中获得的DNA如何定量较好？
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1楼2011-04-05 13:38:23
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
qyunpeng(金币+1): 谢谢！！ 2011-04-05 14:03:58
荧光定量PCR，呵呵~
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2楼2011-04-05 14:00:30
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-05 14:00:30:
荧光定量PCR，呵呵~

哈哈！要定DNA总的含量，而且qPCR对于腐殖酸等杂质多的样品也不好做。
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3楼2011-04-05 14:03:32
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
qyunpeng(金币+1): 谢谢！！ 2011-04-05 18:06:13
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-04-05 19:14:18
1.最老土也是最好用的方法
跑胶用标准DNA来定量就行了；
2.微量DNA定量仪
只需1ul即可定量
相对要准确，系统自动考虑离子呀什么杂质的影响引起的误差
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4楼2011-04-05 17:56:15
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-04-05 17:56:15:
1.最老土也是最好用的方法
跑胶用标准DNA来定量就行了；
2.微量DNA定量仪
只需1ul即可定量
相对要准确，系统自动考虑离子呀什么杂质的影响引起的误差

方法1应该还可以，方法2的话微量DNA定量仪太灵敏啦，很容易有偏差。
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5楼2011-04-05 18:07:18
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wwling

铜虫 (小有名气)
★
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-04-11 20:02:49
qyunpeng(金币+1): 谢谢！！ 2011-04-11 20:54:24
引用回帖:
Originally posted by qyunpeng at 2011-04-05 18:07:18:
方法1应该还可以，方法2的话微量DNA定量仪太灵敏啦，很容易有偏差。

同感，对于杂质太多的DNA用微量DNA定量数据不太可靠，我一般都是牺牲一部分样品用比色皿测。。。心疼啊 不知道有没有好的方法
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6楼2011-04-11 16:36:45
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