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liulinzist

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
taozhikai(金币+3): 谢谢 2011-04-12 09:23:54
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-04-13 15:44:27
不知楼上问题解决没有,你只需要把适量戊二醛加入丝素蛋白溶液中,然后转入-20℃或-80℃冷冻过夜,次日冷冻干燥就可以得到你需要的支架材料,用于细胞培养。
另外想问下,你是如何得到50%高浓度的丝素蛋白溶液的?常规来说这么高浓度的丝素蛋白溶液很容易变性凝固的。
11楼2011-04-12 09:13:43
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mzlfengye

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
taozhikai(金币+1): 谢谢 2011-04-13 10:57:08
lixiangde: 感谢回帖交流 2011-04-13 15:45:02
liulinzist 的问题我也很关注,请楼主解答!!!
12楼2011-04-13 09:49:16
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nannan2ping

新虫 (初入文坛)


lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-04-13 15:44:38
引用回帖:
Originally posted by liulinzist at 2011-04-12 09:13:43:
不知楼上问题解决没有,你只需要把适量戊二醛加入丝素蛋白溶液中,然后转入-20℃或-80℃冷冻过夜,次日冷冻干燥就可以得到你需要的支架材料,用于细胞培养。
另外想问下,你是如何得到50%高浓度的丝素蛋白溶液的 ...

还是没有解决,你是说把戊二醛加入丝素蛋白后马上放入冰箱吗?一点反应时间都没有?醛基和氨基反应得需要一定时间啊?
我试把透析后的丝素蛋白溶液冷冻干燥成粉末,然后称量溶解的,溶解时会有少量沉淀,忽略不计。
13楼2011-04-13 15:31:55
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nannan2ping

新虫 (初入文坛)

★ ★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-04-13 15:44:44
taozhikai(金币+1): 谢谢 2011-04-14 01:32:56
引用回帖:
Originally posted by liulinzist at 2011-04-12 09:13:43:
不知楼上问题解决没有,你只需要把适量戊二醛加入丝素蛋白溶液中,然后转入-20℃或-80℃冷冻过夜,次日冷冻干燥就可以得到你需要的支架材料,用于细胞培养。
另外想问下,你是如何得到50%高浓度的丝素蛋白溶液的 ...

确实,丝素蛋白溶液浓度越高,就越容易凝固,不过,很多文献都是这么高的浓度,除非文献不准,也不排除这种可能
14楼2011-04-13 15:33:01
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bearbear507

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
丝素蛋白在冷冻干燥后不能完全溶解在水里面的,因为在冻干过程中已经部分结晶了。溶解在水里面的可能大部分是丝素蛋白的微小晶体,所以交联不了。
15楼2011-06-27 23:59:16
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0115402

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
丝素蛋白中的氨基比较少,而丝氨酸比较多,羟基多一些,因此增加一些温度,使戊二醛与羟基交联可能会好一些。
另外,直接用透析后的丝素蛋白溶液就可以了,干嘛还要经过冻干步骤,怪麻烦的。
或者加一些PVA 做水凝胶会强度好一些
16楼2011-07-20 15:13:35
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0115402

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
明胶中含有氨基比较多,用戊二醛交联比较好一些,丝素比较难以用戊二醛啊。
冻干成多孔材料后再在60度处理一段时间吧
17楼2011-07-20 15:15:47
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lvqlvq

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
丝蛋白的活性基团少,因此一般交联方法很难成功。丝蛋白同胶原混合使用EDC交联,EDC的用量都要远远大于其它材料所需用量。再说,你没有必要使用交联方法制备多孔支架吧,丝蛋白直接冷冻干燥完全可以获得柔软,成孔型良好的多孔支架,加入交联剂对后续细胞培养还是会有影响的。
18楼2011-07-20 16:33:57
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baodengshan

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
markar: 金币+1, 这是火星文? 2012-06-06 16:21:24
水??胶QQ群:240980681;欢迎加入交????
生命在于运动
19楼2012-06-06 10:26:01
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-06-07 19:04:33
我记得戊二醛交联蛋白质形成凝胶的机理是醛基和蛋白质上的氨基发生反应交联形成凝胶。我不了解丝素,建议你查一下,丝素上面有没有氨基,另外,提高浓度试一下
20楼2012-06-07 18:37:18
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