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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

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[交流] 【求助】样品出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重？已有7人参与

在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin 。首先，这两个化合物是7位和8位的取代基位置互换，其他都一样。在甲醇-水流动相中能分离开，洗脱梯度为70%aq-0；时间为 0-60min，出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重。换乙腈-水后，怎么也分不开。怎么办？？？

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1楼2011-03-28 00:27:16

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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by luojin7653 at 2011-03-28 10:23:23:
基线漂移可以解决的..多平衡一下吧...

首先很感谢朋友的积极建议。由于我的样品至少需要检测5个峰以上，所以，检测范围比较宽。用70％水：30甲醇－0％水：100％甲醇，时间：0－60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的，然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰，有很严重重叠，其中isospinosin ,spinosin就是在这里，但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以，样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。基线漂移，我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件，就这两个化合物进样，梯度范围为25％乙腈－50％乙腈，0-30min, 出峰时间24min左右，分离度0.5，不能完全分离，于是降低乙腈浓度，为20％乙腈－50％乙腈，时间不变，结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min.