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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】MTT结果分析，药物机理解释
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monkey77520

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】MTT结果分析，药物机理解释

是这样的，我做MTT实验，最后的结果是随着浓度（25、50、100、200微克/毫升）增加，抑制作用增强（大概能抑制60%），但是随着时间（1天、2天、3天）的增加，抑制作用减弱（理论上应该是增强的）只是减弱了，仍旧有抑制作用，只是比第一天差了不少，我做了6h、12h的都没有什么抑制作用，我用的是U251癌细胞，冰天雪地裸体360度跪求解释

[ Last edited by monkey77520 on 2011-3-25 at 10:53 ]
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1楼 2011-03-25 10:40:19
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yixinling

金虫 (正式写手)
monkey77520(金币+10): 2011-03-25 12:13:32
引用回帖:
Originally posted by monkey77520 at 2011-03-25 10:40:19:
是这样的，我做MTT实验，最后的结果是随着浓度（25、50、100、200微克/毫升）增加，抑制作用增强（大概能抑制60%），但是随着时间（1天、2天、3天）的增加，抑制作用减弱（理论上应该是增强的）只是减弱了，仍旧有 ...

200ug/ml的浓度才60%的话，我感觉也不是很好的药，U251长得也不慢，可能后面随着培养，没死的细胞又长起来了？
或者你的药本身不是很稳定，溶解度不好，或者水溶液不稳定，或者见光分解之类的，你可以测一下你一天，两天，三天的孔里实际药的浓度看看。
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2楼2011-03-25 11:53:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
monkey77520(金币+5): 我的药物大概几百纳摩尔 2011-03-25 12:24:53
药理学上的东西……请换算成mol浓度……
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3楼2011-03-25 11:54:43
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yixinling

金虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-25 20:52:53
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-25 11:54:43:
药理学上的东西……请换算成mol浓度……

一般的小分子药，我是假设成500左右，这样他那个药就是400nM左右的一个量，高高低低就是这个程度了，IC60在这个程度的话,IC50估计也就300左右吧，好不到哪里去了。你可以把它分子量从100-1000的范围都算一下，其实IC50的偏差也没多少，就在这个区间了。
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4楼2011-03-25 12:01:41
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yixinling at 2011-03-25 11:53:35:
200ug/ml的浓度才60%的话，我感觉也不是很好的药，U251长得也不慢，可能后面随着培养，没死的细胞又长起来了？
或者你的药本身不是很稳定，溶解度不好，或者水溶液不稳定，或者见光分解之类的，你可以测一下你 ...

首先表示感谢，按你这么说的话，有2个可能，一是我的药物抑制速度赶不上细胞增殖速度，二是药物不稳定，可能与培养基什么的发生反应 对不
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5楼2011-03-25 12:15:43
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yixinling at 2011-03-25 12:01:41:
一般的小分子药，我是假设成500左右，这样他那个药就是400nM左右的一个量，高高低低就是这个程度了，IC60在这个程度的话,IC50估计也就300左右吧，好不到哪里去了。你可以把它分子量从100-1000的范围都算一下，其 ...

我的药就是几百nM左右的一个量，现在我的实验重复了好几篇  数据虽然有些差别，但是趋势基本上是随时间的增大，抑制作用变弱
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6楼2011-03-25 12:24:15
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yixinling

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by monkey77520 at 2011-03-25 12:15:43:
首先表示感谢，按你这么说的话，有2个可能，一是我的药物抑制速度赶不上细胞增殖速度，二是药物不稳定，可能与培养基什么的发生反应 对不

很可能自己就分解了，不一定要和培养基反应。我做过几个化合物，都是在溶液中不稳定，而且见光不稳定的。总之了解你的药的性质，做起来会好一点。
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7楼2011-03-25 12:26:22
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yixinling at 2011-03-25 12:26:22:
很可能自己就分解了，不一定要和培养基反应。我做过几个化合物，都是在溶液中不稳定，而且见光不稳定的。总之了解你的药的性质，做起来会好一点。

那这药没什么作用我岂不是白忙活了
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8楼2011-03-25 12:29:44
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yixinling

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by monkey77520 at 2011-03-25 12:24:15:
我的药就是几百nM左右的一个量，现在我的实验重复了好几篇  数据虽然有些差别，但是趋势基本上是随时间的增大，抑制作用变弱

所以啊，几百nM的药，就算现在做出来不错，后面可能成药的意义也不大了。你如果是科研的话还好，如果是在制药企业筛药，其实这个已经可以pass掉了。
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9楼2011-03-25 12:30:17
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
随便提一句，总不至于是药液染菌？
楼上分析的也都有可能。
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10楼2011-03-25 12:49:26
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-03-25 12:49:26:
随便提一句，总不至于是药液染菌？
楼上分析的也都有可能。

药液染菌？啥意思我是这方面的小白
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11楼2011-03-25 14:54:16
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yixinling at 2011-03-25 12:30:17:
所以啊，几百nM的药，就算现在做出来不错，后面可能成药的意义也不大了。你如果是科研的话还好，如果是在制药企业筛药，其实这个已经可以pass掉了。

我这个其实是一种材料，只要能起到对癌细胞的抑制作用就OK了，主要的问题是我现在出现的结果我自己不清楚原因，这个发文章的时候就很纠结了。所以现在想弄2清楚可能的原因，然后拿出一些测试的证据
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12楼2011-03-25 14:57:32
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
monkey77520(金币+5): 2011-03-25 16:54:11
引用回帖:
Originally posted by monkey77520 at 2011-03-25 14:54:16:
药液染菌？啥意思我是这方面的小白

药物母液没有进行无菌过滤？
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13楼2011-03-25 15:06:36
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yixinling

金虫 (正式写手)
monkey77520(金币+5): 2011-03-25 16:55:13
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-03-25 15:06:36:
药物母液没有进行无菌过滤？

怕就怕一般药物就那么100，200微升，配在DMSO里，没有过滤的条件。
而且如果在DMSO里的话，基本也不会有染菌的问题，这个要看楼主的药到底是怎么个情况了。
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14楼2011-03-25 16:45:50
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-03-25 15:06:36:
药物母液没有进行无菌过滤？

没有啊 只用紫外灯照了30min
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15楼2011-03-25 16:54:49
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yixinling

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by monkey77520 at 2011-03-25 16:54:49:
没有啊 只用紫外灯照了30min

这个，有的药用紫外照了也会分解或者变性的啊。
你这个药有颜色么？
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16楼2011-03-25 16:57:17
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yixinling at 2011-03-25 16:45:50:
怕就怕一般药物就那么100，200微升，配在DMSO里，没有过滤的条件。
而且如果在DMSO里的话，基本也不会有染菌的问题，这个要看楼主的药到底是怎么个情况了。

居然还要过滤  没天理吧，我做的不是药物，是纳米材料，主要只要确定纳米材料对癌细胞有抑制作用就行，如果是细菌污染的话，那么在第一天细胞应该就死的差不多了，后面癌细胞肯定竞争不过细菌的，那也不符合我的结果啊
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17楼2011-03-25 16:57:34
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-03-25 15:06:36:
药物母液没有进行无菌过滤？

居然还要过滤  没天理吧，我做的不是药物，是纳米材料，也不是用DMSO配的，用灭菌的PBS配的，主要只要确定纳米材料对癌细胞有抑制作用就行，如果是细菌污染的话，那么在第一天细胞应该就死的差不多了，后面癌细胞肯定竞争不过细菌的，那也不符合我的结果啊
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18楼2011-03-25 16:58:26
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yixinling at 2011-03-25 16:57:17:
这个，有的药用紫外照了也会分解或者变性的啊。
你这个药有颜色么？

没分解，变性可能性也很小，据许许多多的文献报道材料应该很稳定。不是药 是材料  纳米材料 黑色的
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19楼2011-03-25 16:59:55
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henkally

禁虫 (著名写手)
monkey77520(金币+10): 3克油 2011-03-25 18:28:24
silicare(EPI+1): 2011-04-12 18:49:37
标题太吓人了，冰天雪地跪求...
我也来说两句吧，楼主MM的是纳米材料，材料是哪种类型的？粒径多大？
10几个纳米的话，还是过滤除下菌吧，既然是纳米材料，过滤膜没问题的，millipore有0.45微米的滤器。
而且纳米材料，不是修饰过的吧？不是靶向的吧？你的材料对癌细胞有抑制作用，难道对正常细胞不是一样的？我觉得这个应用前景如何？
最后，你的开始抑制效果可以，后来不行了，个人以为是这东西结合到细胞后被结合或者被反应掉？不是太清楚材料性质，不好猜测。建议做个激光共聚焦，看看材料和细胞的关系。
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20楼2011-03-25 17:21:57
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by monkey77520 at 2011-03-25 16:58:26:
居然还要过滤  没天理吧，我做的不是药物，是纳米材料，也不是用DMSO配的，用灭菌的PBS配的，主要只要确定纳米材料对癌细胞有抑制作用就行，如果是细菌污染的话，那么在第一天细胞应该就死的差不多了，后面癌细 ...

哦，具体不太清楚，只是考虑到其中一种情况，看看其他虫友的
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21楼2011-03-25 17:24:33
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by henkally at 2011-03-25 17:21:57:
标题太吓人了，冰天雪地跪求...
我也来说两句吧，楼主MM的是纳米材料，材料是哪种类型的？粒径多大？
10几个纳米的话，还是过滤除下菌吧，既然是纳米材料，过滤膜没问题的，millipore有0.45微米的滤器。
而且纳 ...

好吧下次做的时候过滤下  我的是磁性纳米材料，表面经过修饰的，粒径很小5个纳米
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22楼2011-03-25 18:28:06
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-03-25 17:24:33:
哦，具体不太清楚，只是考虑到其中一种情况，看看其他虫友的

3克油
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23楼2011-03-25 18:29:10
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monkey77520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by henkally at 2011-03-25 17:21:57:
标题太吓人了，冰天雪地跪求...
我也来说两句吧，楼主MM的是纳米材料，材料是哪种类型的？粒径多大？
10几个纳米的话，还是过滤除下菌吧，既然是纳米材料，过滤膜没问题的，millipore有0.45微米的滤器。
而且纳 ...

额  有必要解释下  哥不是MM  虽然弄个女性头像有利于讨论问题，但是哥还是得澄清这个事实
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24楼2011-03-25 18:32:19
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