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【求助/交流】RNA降解
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gdongli8325
铁杆木虫
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虫号: 166431
[交流]
【求助/交流】RNA降解
提RNA后,测量浓度,都很低,在100-200ng/ul之间。跑胶发现RNA拖尾很严重。提取方法都是QIAGEN的盒子提的,个人认为提取过程不是问题。回想可能犯的错误,唯一能想出来的就是洗研钵的时候没有带手套,研钵清洗完后就直接用了。想问一下,这个是不是造成RNA降解的主要原因?
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2011-03-25 04:22:41
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randomqd
木虫
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虫号: 350527
还有可能是你电泳的问题
gdongli8325(金币+3): 2011-04-26 00:31:08
提的没问题。。。电泳没跑好也是有可能的,建议做个对照
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5楼
2011-03-25 16:34:14
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木虫
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虫号: 857506
研钵清洗完是怎么处理的? 不是要高温180°以上8个小时吗?
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2楼
2011-03-25 09:34:12
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yabxxh
木虫
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啥?洗完研钵就直接用了?你不高温处理过夜,也得象征性的用酒精点燃一会啊,这个降解还是很自然的
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3楼
2011-03-25 09:45:23
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szylnl
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gdongli8325(金币+3): 2011-03-25 15:34:01
RNA的降解有两方面的原因,
1 外界RNA酶 2 菌体内部的RNA酶
外界的酶可以通过严谨的操作来去除,你说研钵的问题,有可能,可以再做一次,注意一下这个问题。 如果还是降解,那就要从内部的RNA酶方面来考虑,一般的试剂盒都会要求样品的量不能超过多少,你要注意自己样品的量 不能大于试剂盒上所要求的
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4楼
2011-03-25 14:38:13
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