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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】mRNA水平的差异分析---------关于RT-PCR
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dumeiting

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】mRNA水平的差异分析---------关于RT-PCR已有2人参与

最近有个困惑我的问题，希望大家能我点意见。我做不同条件的mRNA水平的差异分析。涉及到RNA的提取问题：有两个问题：1.在RNA提取的时候，我选择的样品应该是单因素的样品还是经过正交设计后的样品，因为我的不同条件是很多个。
2.我在提取RNA的时候提不到，采用了裂解液，还有热酚法。都提取效果不好。我提取的是细菌。请给个建议吧。万分感谢
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1楼2011-03-23 10:16:42
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dumeiting

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by holyala at 2011-03-23 14:23:40:
......这个主要得看你的实验设计了，不过~~好像提RNA都是必须的，不然怎么用RT-PCR来分析啊~

我现在就困惑在该提哪个的RNA？
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5楼2011-03-23 16:01:33
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+4): 谢谢交流 2011-03-23 15:32:14
提细菌RNA...Trizol法效果就很好啦，很容易的，只要注意一定要用新鲜的样本，并防止RNA降解（比如戴手套口罩，用RNA酶抑制剂等等）就可以了。
另外，做差异分析的话，应该是先做单因素，再做正交试验吧，反正都要做的...哈哈。

[ Last edited by holyala on 2011-3-23 at 11:05 ]
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2楼2011-03-23 11:04:27
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dumeiting

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by holyala at 2011-03-23 11:04:27:
提细菌RNA...Trizol法效果就很好啦，很容易的，只要注意一定要用新鲜的样本，并防止RNA降解（比如戴手套口罩，用RNA酶抑制剂等等）就可以了。
另外，做差异分析的话，应该是先做单因素，再做正交试验吧，反正都要 ...

谢谢你的回答，我万分感谢。做差异分析提RNA，单因素和正交都得提RNA吗？
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3楼2011-03-23 13:14:05
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dumeiting at 2011-03-23 13:14:05:
谢谢你的回答，我万分感谢。做差异分析提RNA，单因素和正交都得提RNA吗？

......这个主要得看你的实验设计了，不过~~好像提RNA都是必须的，不然怎么用RT-PCR来分析啊~
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4楼2011-03-23 14:23:40
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