24小时热门版块排行榜    

查看: 2323  |  回复: 10

xiaoruoqiu

铜虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】各位做霉菌的虫友有没有观察孢子萌发的好方法

如题,本虫想观察所养的一株霉菌无性孢子的萌发过程,苦于没有较好的方法。请问各位虫友有没有做过这个东东,用什么方法比较好呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wingaboy

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
有没有人试过摇瓶培养观察孢子萌发的?
6楼2011-10-08 12:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

yyw30000

铜虫 (小有名气)


把孢子滴在颜色浅的营养液中,再取少许滴于载波片上,盖上盖玻片,合适的温度培养,中间取出来在显微镜下10倍观察,如水分丧失,及时补充。
2楼2011-03-23 17:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoruoqiu

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by yyw30000 at 2011-03-23 17:27:05:
把孢子滴在颜色浅的营养液中,再取少许滴于载波片上,盖上盖玻片,合适的温度培养,中间取出来在显微镜下10倍观察,如水分丧失,及时补充。

这个,营养液加不加琼脂呢,加的话加多少合适?
3楼2011-03-23 17:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyw30000

铜虫 (小有名气)


xiaoruoqiu(金币+5): 2011-03-28 11:38:33
不加琼脂
4楼2011-03-23 17:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyw30000

铜虫 (小有名气)


xiaoruoqiu(金币+5): 好吧,应当给的。要是没其他人回复就全送你 2011-03-23 21:24:35
在液体状态下观察,这个方法不一定成功,但是不妨试一下。
5楼2011-03-23 17:40:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plumplumgxc

金虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
zhang8826857(金币+1): 鼓励回帖交流^_^ 2011-10-13 11:36:37
凹玻片,加无菌水(营养液可以不加),加点孢子 进去。盖盖玻片,注意水要少,让盖片与水之间留点空隙。放培养皿里培养,皿里放浸湿的滤纸,玻片下面垫高,别沾到湿滤纸。该上皿盖。培养,定期取出玻片直接显微观察。要是以上还是不懂,参考微生物试验中的小室培养。
7楼2011-10-10 16:09:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sdmissing

铁虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我们做链霉菌是用的DGM培养基培养孢子悬液,测OD,可以参考一下
8楼2011-11-22 21:28:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoruoqiu

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
8楼: Originally posted by sdmissing at 2011-11-22 21:28:26:
我们做链霉菌是用的DGM培养基培养孢子悬液,测OD,可以参考一下

好办法,严重崇拜
9楼2011-11-23 16:25:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sagast

铁虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
7.3.霉菌染色法7.3.1.Mallory氏染色法[固   定]
10%甲醛水溶液或酒精溶液。
[试   剂]
明矾苏木精溶液
2.5%焰红或5%伊红水溶液Stirling氏结晶紫溶液:   
结晶紫           5g
纯酒精          10ml
苯胺            2ml
蒸馏水          88ml
革兰氏碘溶液:           
碘                1g
碘化钾            2g
蒸馏水         300ml
苯胺分化液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.明矾苏木精染3~5分钟,
3.水洗。
4.2.5%焰红或5%伊红水溶液于56℃染15分钟。
5.水洗。
6.Stirling氏结晶紫溶液5~10分钟。
7.水洗。
8.革兰氏碘溶液1分钟。
9.水洗后以滤纸吸干。
10.苯胺溶液分化数次,至无色脱下为止。
11.二甲苯洗3~4次,树胶封固。
[结   果]
菌丝呈蓝色,芽孢呈红色。



7.3.2.Gridley氏染色法(1953)
[固   定]
10%甲醛水溶液,石蜡切片6微米。
[试   剂]
4%铬酸水溶液Schiff氏试剂:   
碱性品红               0.5g
偏亚硫酸钠               2g
1mol/L盐酸             20ml
活性碳                   3g
蒸馏水                100ml
配制:蒸馏水煮沸后加入碱性品红,待冷至60℃时过滤,加偏亚硫酸钠及盐酸,置普通室温暗处放18~24小时,加活性碳摇荡1分钟,过滤于0~5℃冰箱内。
0.5%偏亚硫酸钠-盐酸溶液:
偏亚硫酸钠.    0. 5g
0.05mol/L盐酸100ml
Gomori氏醛复红溶液:  
碱性品红           0.5g
70%酒精溶液      100ml
盐酸                1ml
多聚乙醛            1ml
配制:先配制盐酸酒精溶液,再加碱性品红及多聚乙醛,24小时后变为紫色即贮于冰箱内。
95%酒精溶液酸性间黄溶液:  
酸性间黄                 0.25g
0.25%醋酸水溶液         100ml
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.4%铬酸氧化1小时。
3.流水冲洗5分钟。
4.浸入Schiff氏试剂15分钟。
5.0.5%偏亚硫酸钠-盐酸溶液换洗3次约2分钟。            
6.水洗15分钟。
7.Gomori氏醛复红溶液15~20分钟。
8.95%酒精溶液洗,再水洗5分钟。
9.酸性间黄溶液染2~5分钟,水洗。
10.常规脱水,透明,封固。
[结   果]
菌丝呈深蓝色,孢子呈玫瑰色或紫红色,酵母菌包膜呈深紫红色,弹力纤维及粘液呈深蓝色,背景为黄色。



7.3.3.Grocott氏六铵银染色法(1955)
[固   定]
10%甲醛水溶液或Helly氏液。
[试   剂]
5%铬酸水溶液1%亚硫酸钠水溶液六铵银溶液:  
3%六次甲基四胺水溶液       100ml
5%硝酸银水溶液              5ml
( 两液混合时呈现乳白色,瞬间透明)
六铵银染色液:
六铵银溶液                 25ml
5%硼砂(四硼酸钠)水溶液    2ml
蒸馏水                     25ml.
0.2%氯化金水溶液2%硫代硫酸钠水溶液核固红染液:
核固红                       0.1g
硫酸铝                        5g
蒸馏水                     100ml
(将硫酸铝溶于蒸馏水,加入核固红煮沸冷却,过滤室温保存)
淡绿染色液:   
淡绿Y                       0.2g
蒸馏水                      100ml
冰醋酸                      0.2ml
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.5%铬酸水溶液氧化60分钟。
3.流水洗涤5分钟。
4.1%亚硫酸钠水溶液1分钟除去铬酸。
5.自来水洗涤5分钟,蒸馏水洗三次。
6.置六铵银染液于45~50℃温箱内60分钟,切片呈浅棕色为止。
7.蒸馏水洗3~4次。
8.0.2%氯化金水溶液调色5分钟。
9.蒸馏水洗涤。
10.2%硫代硫酸钠水溶液固定3分钟。
11.自来水洗涤。
12.入核固红染液染细胞核10分钟。
13.自来水洗涤,蒸馏水洗涤。
14.入淡绿染液(1/10稀释)复染30秒钟,水洗。
15.常规脱水,透明,封固。
[结   果]
10楼2011-11-23 17:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yupeibin

禁虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

11楼2011-11-23 18:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoruoqiu 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 06:57 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见