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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关氯仿-异戊醇
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xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关氯仿-异戊醇

我配的氯仿：异戊醇（24:1）用来提DNA，以前做的没什么大问题，不知道最近为什么加完氯仿异戊醇，漩涡震荡15s后，离心后，蛋白质层不能完全离心沉淀下去（分成了两层）？试剂也刚配过不久，不知道怎么突然这样了，很焦急~~~
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1楼2011-03-17 10:22:04
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by kyoya at 2011-03-17 20:25:39:
氯仿与其他试剂不互溶的，而且密度大，可定会在下层的。你只要把沉淀上层的上清液提取出来就行了！

这个我明白，氯仿是使蛋白质变性，异戊醇能减少震荡产生气泡，问题是抽提后后拿去离心，本应该有机相（下层），蛋白质（中间层）和水相（上层）分清楚，可是最近不知道为什么蛋白质往往有些混到水相上面了，也就是蛋白质没有完全离心下来，不知道问什么
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8楼2011-03-17 21:22:56
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xwsooo

银虫 (小有名气)
还有一个问题：我是用碘化钠法提取外周血DNA，我发现配的碘化钠溶液（棕色瓶中，避光保存）一个礼拜就貌似变氧化了（变成黄色了），不知道有什么解决办法？？
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2楼2011-03-17 11:11:55
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xwsooo

银虫 (小有名气)
自己先顶一下。。。
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3楼2011-03-17 15:21:40
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yesucao

木虫 (正式写手)
★
xwsooo(金币+1):谢谢参与
我提过细菌的DNA，氯仿-异戊醇只是抽提时用的，是分成两层，收集上清就可以了啊，再加其他的东西沉淀DNA。
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4楼2011-03-17 15:31:22
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