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xwsooo

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】有关氯仿-异戊醇

我配的氯仿:异戊醇(24:1)用来提DNA,以前做的没什么大问题,不知道最近为什么加完氯仿异戊醇,漩涡震荡15s后,离心后,蛋白质层不能完全离心沉淀下去(分成了两层)?试剂也刚配过不久,不知道怎么突然这样了,很焦急~~~
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xwsooo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by kyoya at 2011-03-17 20:25:39:
氯仿与其他试剂不互溶的,而且密度大,可定会在下层的。你只要把沉淀上层的上清液提取出来就行了!

这个我明白,氯仿是使蛋白质变性,异戊醇能减少震荡产生气泡,问题是抽提后后拿去离心,本应该有机相(下层),蛋白质(中间层)和水相(上层)分清楚,可是最近不知道为什么蛋白质往往有些混到水相上面了,也就是蛋白质没有完全离心下来,不知道问什么
8楼2011-03-17 21:22:56
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xwsooo

银虫 (小有名气)


还有一个问题:我是用碘化钠法提取外周血DNA,我发现配的碘化钠溶液(棕色瓶中,避光保存)一个礼拜就貌似变氧化了(变成黄色了),不知道有什么解决办法??
2楼2011-03-17 11:11:55
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xwsooo

银虫 (小有名气)


自己先顶一下。。。
3楼2011-03-17 15:21:40
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yesucao

木虫 (正式写手)



xwsooo(金币+1):谢谢参与
我提过细菌的DNA,氯仿-异戊醇只是抽提时用的,是分成两层,收集上清就可以了啊,再加其他的东西沉淀DNA。
4楼2011-03-17 15:31:22
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