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xwsooo

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】有关氯仿-异戊醇

我配的氯仿:异戊醇(24:1)用来提DNA,以前做的没什么大问题,不知道最近为什么加完氯仿异戊醇,漩涡震荡15s后,离心后,蛋白质层不能完全离心沉淀下去(分成了两层)?试剂也刚配过不久,不知道怎么突然这样了,很焦急~~~
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李明芳Eva

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,请教一个问题,我从人外周血提取总RNA,基本实验步骤是这样的:
全血总的提取
将冷冻血解冻并转入的离心管中,加入等体积的去灭菌蒸
懷水,充分混勻后静置30min
将离心管放入离心机,离心30min
弃上清,加入等体积(即的充分混勻,放入离心机,离
心;
弃上清,在另一离心管中加入,将离心管中剩余的沉淀
转入新的离心管中,充分吹打混勻后室温静置30min
加入氯仿,震荡混勾,室温下静置,然后却多数管没有出现分层的情况,只有几个有,我用的是现成的酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),为什么分层不理想呢?楼主帮忙分析下原因好吗?谢谢
34楼2016-01-05 19:55:22
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xwsooo

银虫 (小有名气)


还有一个问题:我是用碘化钠法提取外周血DNA,我发现配的碘化钠溶液(棕色瓶中,避光保存)一个礼拜就貌似变氧化了(变成黄色了),不知道有什么解决办法??
2楼2011-03-17 11:11:55
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xwsooo

银虫 (小有名气)


自己先顶一下。。。
3楼2011-03-17 15:21:40
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yesucao

木虫 (正式写手)



xwsooo(金币+1):谢谢参与
我提过细菌的DNA,氯仿-异戊醇只是抽提时用的,是分成两层,收集上清就可以了啊,再加其他的东西沉淀DNA。
4楼2011-03-17 15:31:22
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