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xwsooo

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】有关氯仿-异戊醇

我配的氯仿：异戊醇（24:1）用来提DNA，以前做的没什么大问题，不知道最近为什么加完氯仿异戊醇，漩涡震荡15s后，离心后，蛋白质层不能完全离心沉淀下去（分成了两层）？试剂也刚配过不久，不知道怎么突然这样了，很焦急~~~

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1楼2011-03-17 10:22:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

李明芳Eva

新虫 (初入文坛)

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虫号: 4047754

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

楼主，请教一个问题，我从人外周血提取总RNA，基本实验步骤是这样的：
全血总的提取
将冷冻血解冻并转入的离心管中，加入等体积的去灭菌蒸
懷水，充分混勻后静置30min
将离心管放入离心机，离心30min
弃上清，加入等体积（即的充分混勻，放入离心机，离
心；
弃上清，在另一离心管中加入，将离心管中剩余的沉淀
转入新的离心管中，充分吹打混勻后室温静置30min
加入氯仿，震荡混勾，室温下静置，然后却多数管没有出现分层的情况，只有几个有，我用的是现成的酚：氯仿：异戊醇（25:24:1），为什么分层不理想呢？楼主帮忙分析下原因好吗？谢谢