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wuzunfeng416

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】土壤真菌PCR已有6人参与

最近再批土壤真菌，没条带，望大家提提建议，用的引物是NS1F和NS8R

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1楼2011-03-15 14:08:23

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hc1027

木虫 (正式写手)

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★
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引用回帖:

9楼: Originally posted by bear0329 at 2011-08-04 16:35:55:
恩啊，DNA还是很好提的

我也提了好几次，效果总是不好，有时根本提不出来。
想请教下细节方面，希望指点：
1、加氯仿异戊醇后混匀是涡旋还是轻轻颠倒混匀，涡旋会使DNA断裂吗？离心速度和时间是多少？
2、70%乙醇洗沉淀如何进行？是直接加到沉淀中后马上就倒掉，还是加了之后轻轻混合然后离心再吸走上清液，离心速度及时间是多少？
3、洗沉淀后一般如何干燥？发现我的样经常风干10多分钟也没见干，请问你是怎么做的呢？
4、用TE或者ddH2O溶解DNA的问题：是直接加进去放置一会就行了，还是要50度左右水浴下呢？还是4度放置过夜之类的？
O(∩_∩)O谢谢