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【求助/交流】southern blot 转膜
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wanghuiyanyx
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MM
专业: 临床微生物学检验
[交流]
【求助/交流】southern blot 转膜
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昨天做了转膜,今早剥下以后,膜拿去固定去了,胶又去染色看了下,发现还有很多没转过去,哎,是不是就意味着又失败了。之前几次转膜都没这样情况,高手指点下啊,大概什么原因。
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1楼
2011-03-12 10:18:22
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shaquila
金虫
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专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
看你上样量多大咯,如果你的片段较大,那么转20小时也转不干净
如果小片段,一般转8小时就可以了
总的来说胶上残留很正常,成不成功看细节操作和样品制备
上图是最新做的,因为不是用同位素,所以上样量较大~~
[
Last edited by shaquila on 2011-3-13 at 11:30
]
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6楼
2011-03-13 11:07:01
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chenshuai1238
金虫
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专业: 影像医学与生物医学工程其
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-03-12 18:29:22
转完膜要尽快取下来吧,转膜一个小时左右就差不多了。中间应该避免气泡产生。
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2楼
2011-03-12 17:40:30
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tigertang
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专业: 细胞增殖、生长与分化
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
避免气泡,换纸,转》24h, 以前没少做,每一部都搞扎实,可以不用照太多同位素
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3楼
2011-03-12 21:49:09
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阿修罗Axuro
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专业: 药物分析
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
上层滤纸和下层滤纸接触短路了吧?胶是不是太薄了?5毫米的胶?
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4楼
2011-03-13 00:00:00
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