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惹待风暴

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Km值测定,Vm怎么换算? 已有5人参与

要测定酶的Km值,纵坐标的Vmax怎么换算,只能测酶活力,怎么换算成反应速率呢?
比如我用酪蛋白为底物,测得的A280为0.2,换算成酶活力后怎么再换算成反应速率?
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lizhijiang

木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by sofili at 2011-03-12 10:24:17:
刚给你发短消息了,希望对你有用

你好,能给我发一份吗?十分感谢
海上生明月,天涯共此时!
3楼2011-03-12 14:00:14
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sofili

银虫 (小有名气)

Km值测定,Vm怎么换算?

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
刚给你发短消息了,希望对你有用
沉淀生活
2楼2011-03-12 10:24:17
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li1977li

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by sofili at 2011-03-12 10:24:17:
刚给你发短消息了,希望对你有用

你好,发给我一份吧。或邮箱:lili5898@yahoo.cn  非常感谢!
4楼2011-03-12 20:55:00
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惹待风暴

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+5): 鼓励新虫参与 2011-03-14 12:31:25
你先做一条水解产物浓度与吸光度间的标准曲线,从标准曲线上就可以得出特定的A280所对应的水解产物浓度,然后用这个浓度除以酶孵化反应的时间就得到速度,根据这个由米式方程变换得来的公式:1/V=Km/Vm*1/[s]+1/[Vm],配一系列不同底物浓度来孵化反应,然后去测吸光度,从而得出V,再用1/V对1/[s]作图,通过所得的斜率与截距,就可以得出Km和Vm了
5楼2011-03-13 22:44:19
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