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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Km值测定，Vm怎么换算？
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惹待风暴

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Km值测定，Vm怎么换算？ 已有5人参与

要测定酶的Km值，纵坐标的Vmax怎么换算，只能测酶活力，怎么换算成反应速率呢？
比如我用酪蛋白为底物，测得的A280为0.2，换算成酶活力后怎么再换算成反应速率？
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1楼 2011-03-11 17:59:56
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lizhijiang

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by sofili at 2011-03-12 10:24:17:
刚给你发短消息了，希望对你有用

你好，能给我发一份吗？十分感谢
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海上生明月，天涯共此时！
3楼2011-03-12 14:00:14
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sofili

银虫 (小有名气)

Km值测定，Vm怎么换算？

★
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刚给你发短消息了，希望对你有用
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沉淀生活
2楼2011-03-12 10:24:17
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li1977li

金虫 (小有名气)
★
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Originally posted by sofili at 2011-03-12 10:24:17:
刚给你发短消息了，希望对你有用

你好，发给我一份吧。或邮箱：lili5898@yahoo.cn  非常感谢！
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4楼2011-03-12 20:55:00
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惹待风暴

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+5): 鼓励新虫参与 2011-03-14 12:31:25
你先做一条水解产物浓度与吸光度间的标准曲线，从标准曲线上就可以得出特定的A280所对应的水解产物浓度，然后用这个浓度除以酶孵化反应的时间就得到速度，根据这个由米式方程变换得来的公式：1/V=Km/Vm*1/[s]+1/[Vm]，配一系列不同底物浓度来孵化反应，然后去测吸光度，从而得出V，再用1/V对1/[s]作图，通过所得的斜率与截距，就可以得出Km和Vm了
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5楼2011-03-13 22:44:19
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