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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 地学 » 土壤学 » 【求助】求助关于土壤蛋白酶和蔗糖酶测定所遇到的问题
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wuuguoyk

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1楼 2011-03-07 00:19:30
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pengweifu

新虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
12楼: Originally posted by 虚拟网盟天下 at 2015-01-02 10:46:50
你好，楼主，我用关松荫的茚三酮比色法测定土壤蛋白酶活性，看到你发的帖子，我也遇到和你一样的问题，沸水浴之后显示茶色，无基质对照颜色浅一些，有基质的显示褐色了，标线是蓝紫色的，但是样品不知道哪里出问题 ...

我也是这样，土壤所有样品水浴都是褐色，标曲是正常的蓝紫色，我都觉得有问题，但吸光度有，请问下你解决了这个问题嘛？谢谢
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14楼2016-10-27 19:32:38
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wuuguoyk

禁虫 (小有名气)
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2楼2011-03-11 12:25:28
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nanoatom

铜虫 (正式写手)
★
wuuguoyk(金币+1):谢谢参与
负值是不是因为蔗糖酶含量低，或者是你保温不好使酶活性失效。
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3楼2011-03-11 12:34:42
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wuuguoyk

禁虫 (小有名气)
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4楼2011-03-11 13:09:03
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nanoatom

铜虫 (正式写手)
★
xuliforever(金币+1): 欢迎常来地学版交流 2011-03-14 22:10:12
引用回帖:
Originally posted by wuuguoyk at 2011-03-11 13:09:03:
谢谢你 不过我是在37℃恒温培养的24小时 应该没得问题。

我记得我们都是在冰浴的条件下做这个酶活性测定的，37度会不会高了点？
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5楼2011-03-14 13:26:26
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龙游天下

禁虫 (正式写手)
★
wuuguoyk(金币+1):谢谢参与
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6楼2011-03-19 12:38:09
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popular289

铁杆木虫 (正式写手)
★
wuuguoyk(金币+1):谢谢参与
wuuguoyk(金币+5): 2011-03-23 16:23:07
蔗糖酶要做无基质和无土壤两组对照，无土壤的对照应该没什么问题，无基质就是不加蔗糖以去除土壤中原有的葡萄糖的影响。因此理论上是不可能颜色较处理组深的。建议你再做一遍，此外，如果蔗糖酶活性确实比较低，你可以吸取2ml滤液显色后测定。
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7楼2011-03-19 16:02:26
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dengyifan

新虫 (初入文坛)
★
wuuguoyk(金币+1):谢谢参与
wuuguoyk(金币+10): 37度不高啊 文献中通用的啊。 2011-09-28 10:58:20
37度高了！这么明显的问题！25度就够了！钱交出来！
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8楼2011-09-28 10:56:37
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yidiniaoren

铜虫 (正式写手)
★
wuuguoyk(金币+1): 谢谢参与
我做水果的蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶也是对照组的吸光值高啊，郁闷
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9楼2012-03-26 09:55:36
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李小西

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by dengyifan at 2011-09-28 10:56:37
37度高了！这么明显的问题！25度就够了！钱交出来！

请问25度培养这个方法出自哪里？我看到的都是37度培养
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10楼2013-08-17 15:15:35
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a2004054

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蔗糖酶需沸水浴，温度低了，可能显色不完全
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11楼2013-09-24 14:48:00
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虚拟网盟天下

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by wuuguoyk at 2011-03-11 13:09:03
谢谢你 不过我是在37℃恒温培养的24小时 应该没得问题。

你好，楼主，我用关松荫的茚三酮比色法测定土壤蛋白酶活性，看到你发的帖子，我也遇到和你一样的问题，沸水浴之后显示茶色，无基质对照颜色浅一些，有基质的显示褐色了，标线是蓝紫色的，但是样品不知道哪里出问题了，你解决了吗？想请教一下您
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12楼2015-01-02 10:46:50
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yingmeiqi

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 虚拟网盟天下 at 2015-01-02 10:46:50
你好，楼主，我用关松荫的茚三酮比色法测定土壤蛋白酶活性，看到你发的帖子，我也遇到和你一样的问题，沸水浴之后显示茶色，无基质对照颜色浅一些，有基质的显示褐色了，标线是蓝紫色的，但是样品不知道哪里出问题 ...

您好，看到你在做土壤蛋白酶活性的测定，我也用的是茚三酮比色法，想请教您一些问题，不知可否赐教。
在做标曲时，我用甘氨酸10ug/mL浓度，分别取0、1、3、5、7、9、11 mL去做，不显色，之后我试了不同的稀释浓度，勉强用5mg/mL做出来相对能用的标曲，不知道您标曲是用什么浓度，取多少做的呢？
我在称样时，取了5g土样，加入的试剂却是与2g土样相同的，不知道会不会有影响？
土样过滤完之后本身有颜色，偏黄，反应完之后，显色不是蓝紫色，测到的吸光值是正值，不知道这样合理不？
请教了，谢谢！
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13楼2015-12-12 23:19:02
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pengweifu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by yingmeiqi at 2015-12-12 23:19:02
您好，看到你在做土壤蛋白酶活性的测定，我也用的是茚三酮比色法，想请教您一些问题，不知可否赐教。
在做标曲时，我用甘氨酸10ug/mL浓度，分别取0、1、3、5、7、9、11 mL去做，不显色，之后我试了不同的稀释浓度 ...

我也是这样，土壤所有样品水浴都是褐色，标曲是正常的蓝紫色，我都觉得有问题，但吸光度有，请问下你解决了这个问题嘛？谢谢
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15楼2016-10-27 19:33:00
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