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lsx08

新虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】蛋白质含量测定

我想用凝胶柱分离不同分子量的蛋白质,结果很不理想,分离不开,不知有没有做过这方面的高手可以指点一下,谢谢!
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lisa68320

新虫 (初入文坛)


★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-07 11:13:33
lsx08(金币+2): 2011-03-07 14:19:29
引用回帖:
Originally posted by lsx08 at 2011-03-07 08:45:13:
我要分离的是10KD~40KD的蛋白质,但是样品中的蛋白质含量很低,根本不出峰,加大样品浓度也不行,这该怎么办呢?还有就是你们实验室用的色谱条件(流动相、流速等)能否赐教一下?十分感谢!

浓度低不出峰只能说明你的样本太稀,可能需要你将样本加倍浓缩才行。我们一般都会用milipore公司的浓缩装置浓缩样本然后上样。条件因蛋白而异,也根据你后续实验而异,只要不会使蛋白发生变形就行。祝你好运
8楼2011-03-07 09:53:37
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查看全部 16 个回答
★ ★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-05 19:09:52
翱宇(金币+1): 鼓励交流! 2011-03-05 22:11:47
lsx08(金币+1): 2011-03-07 08:39:39
lsx08(金币+1): 2011-03-07 14:36:51
凝胶柱的选择很重要,不同型号分离范围不一样的。如果两个蛋白分子量相差不是很的话,还是选择其他的方法分离,效果会好点。
2楼2011-03-05 18:18:02
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cjl2fl

金虫 (正式写手)


是不是吸附有问题,或者纯化的方法要换下?
试试CMC株呢?
3楼2011-03-05 21:12:46
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vmuch520

至尊木虫 (文坛精英)


我完全不懂这个...
什么电泳法。。。行不?
4楼2011-03-05 21:36:57
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