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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】药物致组织细胞凋亡的caspase活性检测需要多大的组织？（昆虫、动物）
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heartear1

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】药物致组织细胞凋亡的caspase活性检测需要多大的组织？（昆虫、动物）

药物致组织细胞凋亡的caspase活性检测需要多大的组织？或者多重？
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1楼 2011-03-04 11:19:48
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
你用什么方法测？
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2楼2011-03-04 11:24:17
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heartear1

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-04 11:24:17:
你用什么方法测？

提取酶——加底物DEVD-pNA——裂解底物——比色
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3楼2011-03-04 14:48:25
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-04 18:09:55
引用回帖:
Originally posted by heartear1 at 2011-03-04 14:48:25:
提取酶——加底物DEVD-pNA——裂解底物——比色

可见光的方法不是很灵敏，最好能搞到6次方个细胞~~

如果你用荧光素酶的方法，那么96孔板足矣
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4楼2011-03-04 15:21:52
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heartear1

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-04 15:21:52:
可见光的方法不是很灵敏，最好能搞到6次方个细胞~~

如果你用荧光素酶的方法，那么96孔板足矣

如果按组织块来说的话，几毫克的组织块能满足要求呢？（可见光）
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5楼2011-03-04 18:52:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
heartear1(金币+20): 谢谢！ 2011-03-04 21:43:20
引用回帖:
Originally posted by heartear1 at 2011-03-04 18:52:26:
如果按组织块来说的话，几毫克的组织块能满足要求呢？（可见光）

主要是看最后提的蛋白的量~~组织的话，几毫克应该还是够的，可以试试
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6楼2011-03-04 19:34:50
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heartear1

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-04 19:34:50:
主要是看最后提的蛋白的量~~组织的话，几毫克应该还是够的，可以试试

就是说要测测蛋白的量是吧 碧云天的一个试剂盒的说明书里也提到了这个问题

谢谢了！几乎每次都是ATP在帮我啊~！
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7楼2011-03-04 21:41:45
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xhjggl

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 对生工了如指掌啊 2011-03-06 16:12:26
看天: 不能做广告 2011-03-06 21:29:15
全蛋白提取试剂盒
Tissue or Cell Total Protein Extraction Kit       
产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效,可以提取出培养细胞或动物组织中的决大多数蛋白质。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀，酶活性分析，Pull down,EMSA等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂，可以每次从107个培养细胞或200mg动物组织提取蛋白质，本试剂盒可以使用50次。储存条件：2～8℃。
产品特点：
1．提取的蛋白质包括膜,核,核基质和胞质蛋白,而且最大限度保持蛋白质活性；
2．整个操作过程只需要30分钟左右；
3．即可以用于培养细胞（50x107个），有可以用于动物组织（50x200mg）蛋白质的提取；
4．避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解，保持蛋白质的完整性和天然活性；
5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
编号        包装        价格        产地
BSP003        50 Assays        520        生工
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8楼2011-03-06 15:45:56
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
生工男你好，生工男再见
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9楼2011-03-06 17:53:42
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heartear1

银虫 (小有名气)
广告啊
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10楼2011-03-06 20:56:19
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