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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】毕赤酵母表达用培养基BMGY BMMY的详细配制方法，请赐教。
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xiwang88

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】毕赤酵母表达用培养基BMGY BMMY的详细配制方法，请赐教。 已有9人参与

第一次摸索毕赤酵母表达。用的是丁香园 的毕赤酵母表达实验手册。做到表达那步。选用BMGY BMMY培养基表达。
关于此两种培养基的配制方法。网上查询配方：

BMGY/BMMY：2%蛋白胨，1%酵母提取物，100 mM磷酸钾缓冲液(pH6.0)，1.34% YNB，4×10-5 生物素，1%甘油/0.5%甲醇。


这个100 mM磷酸钾缓冲液(pH6.0)要怎样达到呢？

按网上某前辈的方法

酵母提取物   10g/L
       蛋白胨      20g/L
        K2HPO4       3g/L
        KH2PO4         11.8G/L
        超纯水      895Ml
        YNB              13.4g/L

121摄氏度灭菌后，培养基是浑浊的。无法使用啊。

所以想问问这两种培养基，各位的配制方法是怎样的呢？赐教吧。新人一个，连个培养基都不会配~~~~~帮帮我吧。
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1楼 2011-03-03 15:22:16
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
正常的，可能是磷酸缓冲液与其它成分里的钙离子形成的沉淀，等培养基凉下来之后摇摇就会少很多，对表达没有影响的，放心用吧！！
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11楼2011-03-04 22:24:25
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姜大磊

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiwang88 at 2011-03-03 15:22:16:
第一次摸索毕赤酵母表达。用的是丁香园 的毕赤酵母表达实验手册。做到表达那步。选用BMGY BMMY培养基表达。
关于此两种培养基的配制方法。网上查询配方：

BMGY/BMMY：2%蛋白胨，1%酵母提取物，100 mM磷酸钾缓 ...

学习中···
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Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
2楼2011-03-03 15:28:02
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xiwang88

新虫 (初入文坛)
YNB以前试过可是高压灭菌的呀，也不会有问题，为什么这次的就是配出来时浑浊的，那是不是表示培养基的ph不对？可是100 mM磷酸钾缓冲液(pH6.0)到底要怎么配制呢？
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-03 15:33:44
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1  各种成分分开高压
2  110°即可
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-03-03 15:39:28
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