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nestzhao

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】关于双层平板发

在进行双层平板法培养噬菌体时，倾倒上层培养基时，温度低点，很容易凝固，无法很好的形成上层琼脂；温度高一点，怕使菌体失活或活性降低。

所以要向大家请教一下，有没有什么好方法，能够方便的倾倒上层琼脂？
在做双层平板法时需要注意什么？？

谢谢大家乐哈

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1楼 2011-03-02 16:32:33

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春雨chen

铁虫 (初入文坛)

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★ ★
nestzhao(金币+1): 2011-03-29 21:05:03
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-03-30 11:10:41

大多数噬菌体耐冷不耐热，大多数噬菌体于55～60℃，几分钟至十几分钟即被灭活，100℃时在几秒钟内即可灭活噬菌体。
直接加热溶解培养基会使培养基水分减少，高压灭菌15min可以避免水分减少且可以二次灭菌。培养基溶解后放到水浴箱中51或52度保温。
等下层凝后再从水浴箱中拿出与寄主细胞混合，倒到平皿后迅速铺平。