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wazlf

银虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】PCR后没有目的条带,有非特异性条带,求解决办法??

我做的是线粒体16s ,长度大约为600bp,但是PCR后没有目的条带,只有230bp左右的条带,附有图片,请哪位高手指导一下,非常感谢!
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★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流。 2011-02-27 14:07:04
引用回帖:
Originally posted by wazlf at 2011-02-27 13:47:57:
我做的是线粒体16s ,长度大约为600bp,但是PCR后没有目的条带,只有230bp左右的条带,附有图片,请哪位高手指导一下,非常感谢!

你指的230bp左右的条带是最左边的那个么?

觉得特异性好差啊,用的是通用引物还是你自己设计的呢?

PCR反应体系,条件也列一下吧。

中间那么多亮带是不是引物二聚体呢?
3楼2011-02-27 13:56:17
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★ ★
wazlf(金币+1): 2011-02-27 15:28:55
dhd997(金币+2): 对了 2011-02-28 10:46:11
引用回帖:
Originally posted by wazlf at 2011-02-27 13:47:57:
我做的是线粒体16s ,长度大约为600bp,但是PCR后没有目的条带,只有230bp左右的条带,附有图片,请哪位高手指导一下,非常感谢!

兄弟,以后有PCR的问题请在下面这个帖子里面问哈。

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2897252&fpage=1
2楼2011-02-27 13:49:42
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,不好意思,楼主貌似是位MM,这个头像。。。。。。火影看多了。。
4楼2011-02-27 14:04:15
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wazlf

银虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-27 13:49:42:
兄弟,以后有PCR的问题请在下面这个帖子里面问哈。

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2897252&fpage=1

呵呵,没关系啦!我也喜欢火影。是在文献上看见的,有人做过,只是为后来的长PCR做引物设计用。
PCR条件:
预变性94℃,3min——变性94℃45s——51℃退火1min——72℃延伸1min,共运行35个循环,最后延伸10分钟。最左边的那个不是,是师兄让我帮他顺便看看maker怎么样。
5楼2011-02-27 15:39:16
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