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【求助/交流】连接转化-好难
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runze116
铁虫
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帖子: 38
在线: 43分钟
虫号: 1204111
[交流]
【求助/交流】连接转化-好难
最近做一个载体的构建,最后一个片段连接,做了不下10次了,依然没有结果。
现在严重怀疑自己的实验技能和人品。
请大家帮忙。
我的载体和DNA片段酶切位点为SacII和NotI,不知道是不是这两个酶有什么不同?
或者胶回收试剂盒的问题?
或者连接酶的问题?
再或者感受态细胞的问题?
现在搞得我对什么都怀疑,但是以前都用这套体系是可以出来的。
好纠结... ...
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2011-02-26 12:45:40
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金虫
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在线: 65.7小时
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runze116(金币+1): 2011-03-01 08:11:51
你说的没有结果,是指什么结果?连接不成功还是连接后鉴定不对?还是什么其他的……………………
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8楼
2011-02-26 16:15:43
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hzkui602
新虫
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在线: 4.6小时
虫号: 1203062
如果怀疑这些东西,那就一步步检测吗!
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2楼
2011-02-26 12:54:32
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brightfuture01
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★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-02-26 13:35:30
runze116(金币+1): 2011-03-01 08:11:22
每一步都将对照做好了,一步步排除。
比如实验室其他人最近做成功过,那么证明感受态是没有问题的。
如果人家也是用的你的那两个酶,那证明酶也是没有问题的。
换个人帮你做一次。。。。。。
有的时候还真可能是RP问题,
,开玩笑的,每个人的操作可能有差异罢了。
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3楼
2011-02-26 13:01:09
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★
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-02-26 13:35:40
能把你连接转化的实验方法发上来吗?大家一起看看有什么问题
涉及的酶要把厂家写上来
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4楼
2011-02-26 13:12:19
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