应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】连接转化-好难
51/1返回列表
查看: 1951  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

runze116

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】连接转化-好难

最近做一个载体的构建，最后一个片段连接，做了不下10次了，依然没有结果。
现在严重怀疑自己的实验技能和人品。
请大家帮忙。
我的载体和DNA片段酶切位点为SacII和NotI，不知道是不是这两个酶有什么不同？
或者胶回收试剂盒的问题？
或者连接酶的问题？
再或者感受态细胞的问题?
现在搞得我对什么都怀疑，但是以前都用这套体系是可以出来的。
好纠结... ...
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-02-26 12:45:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

power103

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果你确定protocol不错的话，可以用另一个带有你用的那两个酶的酶切位点的质粒做一下对照，如果能切下来，说明你的质粒用问题，建议你测一下序去。
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2011-03-02 23:25:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

hzkui602

新虫 (初入文坛)
如果怀疑这些东西，那就一步步检测吗！
赞一下 回复此楼
2楼2011-02-26 12:54:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-02-26 13:35:30
runze116(金币+1): 2011-03-01 08:11:22
每一步都将对照做好了，一步步排除。

比如实验室其他人最近做成功过，那么证明感受态是没有问题的。

如果人家也是用的你的那两个酶，那证明酶也是没有问题的。

换个人帮你做一次。。。。。。

有的时候还真可能是RP问题，，开玩笑的，每个人的操作可能有差异罢了。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-02-26 13:01:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-02-26 13:35:40
能把你连接转化的实验方法发上来吗？大家一起看看有什么问题
涉及的酶要把厂家写上来
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-02-26 13:12:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭