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wening

银虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】重组菌表达蛋白量如何测定?

本人在做一个大肠杆菌重组体蛋白表达实验,请问大家,菌体蛋白表达量如何测定?
有几种方法?

请大伙给弟回答回答,金币送上!!!

[ Last edited by wening on 2011-2-26 at 11:23 ]
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wening

银虫 (正式写手)


求具体方法,把贴先顶起来
5楼2011-03-03 15:44:43
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★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-02-26 10:21:41
wening(金币+2): 还解决不了我心中的疑问,不过谢谢了 2011-03-10 08:31:37
引用回帖:
Originally posted by wening at 2011-02-26 10:09:48:
本人在做一个大肠杆菌重组体蛋白表达实验,请问大家,菌体蛋白表达量如何测定?
有几种方法?
这个蛋白表达量计算的时候是总蛋白还是目标蛋白?
请大伙给弟回答回答,金币送上!!!

表达量当然是目标蛋白了。做SDS-PAGE,凝胶分析目标蛋白百分含量,总蛋白浓度通过考马斯亮蓝法测定。
2楼2011-02-26 10:17:52
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wening

银虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-02-26 10:17:52:
表达量当然是目标蛋白了。做SDS-PAGE,凝胶分析目标蛋白百分含量,总蛋白浓度通过考马斯亮蓝法测定。

做SDS-PAGE 用什么软件分析? 有没有具体点的方法呢?
3楼2011-02-26 11:25:32
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nathing

银虫 (小有名气)


★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-02-27 10:27:06
wening(金币+1): 2011-03-10 08:32:07
粗放测量:将菌裂解后,跑SDS-PAGE,根据目标条带的大小来判断。
准确测量:若所表达的蛋白有标签的话,可以纯化后,测量OD280定量。
4楼2011-02-27 08:32:43
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