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janeeyrezh

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助】帮分析下总氮的标准曲线是怎么回事？急！在线等！

我第一次做做总氮的标准曲线，就只能是按照书上的做，做的过程出了点问题，没有找到合适的解决方案，请大家帮忙，谢谢！
具体如下：
取0.7218g的硝酸钾溶于去离子水，定容至1000ml作为贮备液体；使用时，将贮备液稀释10倍，故吸取10ml贮备液于100ml容量瓶，然后做七组空白样，即分别从100ml容量瓶吸取0、1、2、3、4、5、6ml的稀释贮备液体溶液于七个50毫升的比色管中，再分别加25ml的过硫酸钾（1L溶液加 20g的过硫酸钾溶和3g氢氧化纳）
测其吸光度，做标准曲线，发现A220-A275尽然是负值，百思不得其解，连做了三次，还是负值：

第一次空白样值：
样品号类型 wl 220.0 wl275.0 A220-A275
0 Unknown 0.004 0.03 -0.025
1 Unknown 0.021 0.046 -0.025
2 Unknown 0.03 0.057 -0.027
3 Unknown 0.05 0.034 0.015
4 Unknown 0.064 0.048 0.016
5 Unknown 0.061 0.081 -0.019
6 Unknown 0.069 0.094 -0.025

第二次空白样值：
样品号类型 wl 220.0 wl275.0 A220-A275
0 Unknown 0.006 0.032 -0.026
1 Unknown 0.038 0.06 -0.022
2 Unknown 0.006 0.019 -0.013
3 Unknown 0.016 0.05 -0.034
4 Unknown 0 -0.001 0.001
5 Unknown 0.018 0.039 -0.021
6 Unknown 0.014 0.014 0

第三次空白样值：
样品号类型 wl 220.0 wl275.0 A220-A275
0 Unknown 0.029 0.015 0.014
1 Unknown 0.034 0.068 -0.034
2 Unknown 0.023 0.025 -0.002
3 Unknown 0.035 0.055 -0.02
4 Unknown 0.018 0.025 -0.007
5 Unknown 0.031 0.056 -0.025
6 Unknown 0.006 -0.007 0.013

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1楼 2011-02-19 23:38:36

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shuiyuan165

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by 32531400 at 2011-02-23 09:23:49:
你定氮仪测什么？？？我感觉用定氮仪的时候，涉及气体，例如测氨氮～～
总氮的氮你用啥方式把它都变成气体呢？

我测土壤中的总氮，就是把土壤中的有机氮转化为无机氮。。。具体原理，呵呵，用凯氏定氮法啦。。。

凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热，经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程，最后有机氮转变为无机氮硫酸铵，这一过程称为有机物的消化。为了加速和完全有机物质的分解，缩短消化时间，在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂，加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解，除硫酸钾外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点，但效果不如硫酸钾。硫酸铜起催化剂的作用。凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多，除硫酸铜外，还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等，但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素，应用最广泛的是硫酸铜。使用时常加入少量过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物氧化。消化完成后，将消化液转入凯氏定氮仪反应室，加入过量的浓氢氧化钠，将NH4+转变成NH3，通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内，硼酸接受氨后，形成四硼酸铵，然后用标准盐酸滴定，直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数，通过计算即可得出总氮量。在滴定过程中，滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定。测定出的含氮量是样品的总氮量，其中包括有机氮和无机氮。
反应式如下：

1.有机物中的氮在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，消化生成（NH4）2SO4

反应式为： H2SO4==SO2+H2O+[O]

                  R. CH.COOH+[O]==R.CO.COOH+NH3

                     NH3

                  R.CO.COOH+[O]==nCO2+mH2O

                  2NH3+H2SO4==(NH4)2SO4

2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于 H3BO3 溶液中

反应式为： 2NH4++OH-==NH3+H2O

                  NH3+H3BO3==NH4++H2BO3-

3. 再用已知浓度的HCI标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量。

反应式为： H2BO3-+H+==H3BO3

蛋白质是一类复杂的含氮化合物，每种蛋白质都有其恒定的含氮量[约在14％~18％，平均为16％（质量分数）]。凯氏定氮法测定出的含氮量，再乘以系数6.25，即为蛋白质含量。