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【求助/交流】半胱氨酸在蛋白中是以二硫键形式存在还是以巯基存在的检测方法
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dudu1161
银虫
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帖子: 112
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虫号: 737446
[交流]
【求助/交流】半胱氨酸在蛋白中是以二硫键形式存在还是以巯基存在的检测方法
如题,请帮忙指点,不胜感激!
我是原核表达的蛋白,该蛋白富含Cys,因此想检测下,Cys的存在形式(以二硫键形式存在还是以巯基存在),请教贵实验室用的方法,多谢指点!
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2011-02-17 10:26:58
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genius_liu
铜虫
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虫号: 1073333
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2楼
:
Originally posted by
sdhxwp
at 2011-02-17 15:06:38:
可以用DTNB,能和还原态的cys反应,无色的DTNB将被转变成黄色,产物在412有吸收,结合280的吸收,可以测定还原态的cys的个数。但如果cys被包埋的话就没法测了,不过可以变性后测。
DTNB能定量SH的量么?怎么定量呢那?谢谢
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7楼
2011-11-30 11:23:04
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sdhxwp
金虫
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虫号: 781184
★
dudu1161(金币
+1
):谢谢参与
可以用DTNB,能和还原态的cys反应,无色的DTNB将被转变成黄色,产物在412有吸收,结合280的吸收,可以测定还原态的cys的个数。但如果cys被包埋的话就没法测了,不过可以变性后测。
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2楼
2011-02-17 15:06:38
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wyhwawj_87
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★
dudu1161(金币
+1
):谢谢参与
你的蛋白富含Cys,并且表达了是吗?!我现在也一直在做富含cys的多肽表达,不是很顺利啊,请教下经验,表达载体,宿主菌,或是方法,呵呵 ~~ 可以发我邮箱啊
wyhwawj_87@163.com
谢谢了
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3楼
2011-03-30 20:33:12
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jjwl_rscn
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虫号: 1162717
★
dudu1161(金币
+1
):谢谢参与
是不是两种官能团都有啊
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4楼
2011-03-31 17:17:55
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