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【求助/交流】DGGE的问题
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gemmy冷心
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[交流]
【求助/交流】DGGE的问题
我做DGGE的时候,制胶之后点样孔里总是剩下一点液体,看上去也不是没凝好的胶,然后点样的时候样品总是忘旁边的孔里跑,飘得特别厉害,大家有没有见过这种情况?有什么意见啊?求指教啊……
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2011-02-10 10:00:52
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★ ★ ★ ★
gemmy冷心(金币
+1
):谢谢参与
西瓜(金币+3): good 2011-04-22 16:06:12
我也遇见过这些情况,点样时往邻孔飘,而且挺严重的,现在已经基本没这种情况了,我主要是先往里面注满电泳槽里的buffer,点样的时候尽量慢些。我孩遇见另一种情况是,拔了梳子后会发现胶孔底部有些凹槽,不知道会不会影响结果,请教下各位高手、
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10楼
2011-04-22 16:03:51
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gemmy冷心(金币
+1
):谢谢参与
amisking(金币+2): good! 2011-02-10 19:18:32
引用回帖:
Originally posted by
gemmy冷心
at 2011-02-10 10:00:52:
我做DGGE的时候,制胶之后点样孔里总是剩下一点液体,看上去也不是没凝好的胶,然后点样的时候样品总是忘旁边的孔里跑,飘得特别厉害,大家有没有见过这种情况?有什么意见啊?求指教啊……
那是你的丙烯酰胺胶 凝固过程中产生的溶液,通常是高离子强度。
所以通常我们要用热的电泳缓冲液冲洗若干次。然后再上样。
小记:每个点样孔要清洗干净,否则不同的离子强度影响电泳的迁移率。
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2011-02-10 10:14:41
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gemmy冷心(金币
+1
):谢谢参与
应该算是正常的,会有一点点胶不会凝固。你做好胶后把胶放在加热的电泳槽旁,高温会促进胶的凝固。如果很像块点凝固,就用电吹风吧,不过我不推荐这样。
加样的时候的样品飘到别的空也很常见。。。呵呵。。。注意动作轻就好了。。。
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2011-02-10 12:53:26
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gemmy冷心
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Originally posted by
lordring
at 2011-02-10 11:04:46:
可是飘得很严重呢 会很快量也挺大的 所以影响到旁边的样品结果呢
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6楼
2011-02-12 09:53:11
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