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20040359

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】半定量RT-PCR的循环数30个是不是太多了啊

如题。。
欢迎交流。。
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引用回帖:
Originally posted by xnbioinfor at 2011-01-23 10:23:03:



半定量不是比较各个样品条带的亮度吗? 以刚好能看见为宜是什么程度

是啊,但是你好好去看一下PCR动力学方面的材料就知道,只有在指数期比较才是最准确的
然而一般跑胶能看见条带的时候,指数期都快过半了,如果再往后进入线性期甚至平台期,那么就会得出假阴性的结果
8楼2011-01-23 10:30:48
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20040359(金币+2): 2011-01-22 19:53:31
是比较多。要摸一个最佳循环数,以跑胶刚好能看见为宜
2楼2011-01-22 15:13:36
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20040359

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-01-22 15:13:36:
是比较多。要摸一个最佳循环数,以跑胶刚好能看见为宜

请问一般以多少循环为宜?
谢谢啊  20 -25吧。。
3楼2011-01-22 19:53:24
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★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-23 13:36:37
引用回帖:
Originally posted by 20040359 at 2011-01-22 19:53:24:


请问一般以多少循环为宜?
谢谢啊  20 -25吧。。

没有定数,不过你说的范围也可以
最好是以刚好能看见为宜,不过为了保证每次都能扩出来,就再往上加多一两个循环
4楼2011-01-22 20:14:00
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