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pidou213

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[交流] 【求助/交流】毕赤酵母表达

本人在电转整合目的基因至酵母中后，然后提取酵母基因组，并PCR扩增，然后测序鉴定，发现序列没有任何问题。但是在做Western的时候却做不出条带，请问有什么可能？

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1楼 2011-01-22 00:31:28

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rioarsenal

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by pidou213 at 2011-02-19 01:27:06:
启动子的意思是？？

我表达的是胞内

启动子，基因表达必须的啊。没它如何转录。另外，目的基因有没有内含子序列啊，在酵母里能否正确剪切？细胞内的蛋白要破细胞，是否操作过程中有损失呢？为何不改成分泌蛋白呢？

赞一下(1人)

15楼2011-08-11 06:26:19

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pidou213

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引用回帖:

Originally posted by lxj341401 at 2011-01-22 10:19:17:
ORF是否正确。

绝对正确

4楼2011-01-22 11:01:38

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cxl_yll

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pidou213(金币+1): 元宵节快乐 2011-02-17 21:38:43
pidou213(金币+1): 2011-08-06 14:06:21

你用的什么载体啊？启动子对不？实在不行做个RT-PCR看看能出来东西不？

5楼2011-02-17 13:36:06

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pidou213

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引用回帖:

Originally posted by cxl_yll at 2011-02-17 13:36:06:
你用的什么载体啊？启动子对不？实在不行做个RT-PCR看看能出来东西不？

可能是因为挑取的菌斑太少了，呵呵谢谢啊

6楼2011-02-17 21:38:30

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