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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1.2
帖子: 255
在线: 35.9小时
虫号: 952726

[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳1×TAE配的不好用什么后果

取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml，晃了几下，然后就用来制胶了，但是PCR电泳的结果不好，条带很弱，而且上午跑出来的几条带，竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀，这样会导致什么样的后果呢？ TAE怎么配才能让结果完美呢

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1楼 2011-01-18 10:17:58

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hello466725

金虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 638.3
帖子: 50
在线: 37.1小时
虫号: 1153681

★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-18 15:08:50

都是这么配的。
如果PCR做的过程不出任何问题，TAE摇匀跑，电泳不会出问题哒。
要是没有摇匀，最多就是跑出来条带不整齐，但不至于跑不出来。
跑不出来的话，得考虑你的PCR条件问题了。

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7楼2011-01-18 12:22:06

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-18 15:08:14

引用回帖:

Originally posted by xnbioinfor at 2011-01-18 10:17:58:
取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml，晃了几下，然后就用来制胶了，但是PCR电泳的结果不好，条带很弱，而且上午跑出来的几条带，竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀，这样会导致什么样的后果呢？ TAE怎么配才能让 ...

TAE没混匀，离子强度和pH就有问题，对电泳肯定有影响。
要让结果完美也不单单是TAE的问题了，各个步骤都要注意。

赞一下(2人)

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2楼2011-01-18 10:34:25

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